構建sgRNA+cas9載體活性鑒定——科研合作/成果轉化，行業標桿！
產品名稱： 構建sgRNA+cas9載體活性鑒定——科研合作/成果轉化，行業標桿！
英文名稱： western
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產品價格： 歡迎來電詳詢023-65316016，023—65316556
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品牌商標： null
更新時間： 2023-07-31T09:56:51
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?構建sgRNA+cas9載體活性鑒定
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Surveyor法及測序驗證：
????CRISPR/Cas9打靶基因后引入的突變的方式與ZFN、TALEN基本一致，都是NHEJ或是HR。因此在CRISPR/Cas9的應用中，活性檢測或是突變效率的檢測可以參照ZFN和TALEN方法.主要包括有:靶位點直接PCR后TA克隆測序和基于可以識別錯配雙鏈的錯配內切酶檢測法（Surveyor法）。
????Surveyor法即錯配酶法：靶序列經CAS/sgRNA切割后由于缺乏修復模板，將主要以非同源重組的方式進行修復，或多或少會插入或刪除一些堿基。因此將靶序列PCR擴增后經變性、退火，將形成錯配。錯配酶（主要是CEL1或T7E1酶）將識別錯配的雜合雙鏈并剪切。產物跑電泳，比較切割條帶與未切割條帶的比例，即可反映出Cas/sgRNA的活性。
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【本平臺合作項目】
分子診斷、病理診斷、藥效學評價、毒理學實驗、細胞藥篩、動物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因編輯、病理檢測、基因芯片、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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