????????????????????????????????小鼠原B細胞株(BaF3)
貨號：MIMCL-021
細胞特性
1）?來源：小鼠淋巴
2）?形態：圓形，懸浮生長
3）?含量：>1x106?個/mL
4）?污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）?規格：T75瓶或者1mL凍存管包裝
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運輸和保存：使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T75培養瓶中培養，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
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細胞用途：僅供科研使用。
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細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）?準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022,?添加NaHCO3?1.5g/L,?D-葡萄糖2.5g/L,?丙酮酸鈉?0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%，添加10ng/ml?rmIL-3?(重組鼠白細胞介素3)
2）?培養條件：?氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。?溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）?凍存液：90%完全培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．?細胞處理：
1）?復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）?細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
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注意事項：?
1.?收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2.?所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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賽百慷（上海）生物技術股份有限公司
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