一步法RNA提取試劑 TRIZOL-核酸純化-試劑-生物在線
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一步法RNA提取試劑 TRIZOL

一步法RNA提取試劑 TRIZOL

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產品名稱: 一步法RNA提取試劑 TRIZOL

英文名稱: TRIZOL

產品編號: 15596-026

產品價格: 0

產品產地: 美國

品牌商標: Invitrogen

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RIzol的成分:

  TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞,使細胞中的蛋白,核酸物質解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中還加入了8-羥基喹啉、異硫*酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase(RNA酶)。

  ※0.1%的8-羥基喹啉可以抑制RNase,與氯仿聯合使用可增強抑制作用。

  ※異硫*酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質并使蛋白質二級結構消失,導致細胞結構降解,核蛋白迅速與核酸分離。

  ※β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質中的二硫鍵。

TRIzol的使用方法:

  用勻漿器將組織磨碎,加入TRIzol處理組織。5分鐘后加入氯仿,以每分鐘12000轉離心5分鐘,樣品即分成水樣層、中間層和有機層。

  ※RNA存在于水樣層中,收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀RNA來還原。

  ※在除去水樣層后,有機層中的DNA和蛋白質也能相繼以沉淀的方式還原:乙醇能使中間層的DNA沉淀析出,在有機層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質。

  每100ml TRIzol可以抽提100個六孔板中的樣品或100個50-80mg的組織樣品。無論樣品是人、動物、植物還是細菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(約五百萬個)及大量的組織(≥1g)和細胞(超過一千萬個)均有較好的分離效果。

  每一百萬細胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA,每毫克組織用TRIzol抽提可得1-10微克RNA(產量因細胞和組織不同而異)。

  TRIzol操作上的簡便性允許其同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內完成。

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