一步法RNA提取試劑 TRIZOL
產(chǎn)品名稱： 一步法RNA提取試劑 TRIZOL
英文名稱： TRIZOL
產(chǎn)品編號： 15596-026
產(chǎn)品價格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國
品牌商標(biāo)： Invitrogen
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RIzol的成分:
TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細(xì)胞，使細(xì)胞中的蛋白，核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質(zhì)，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中還加入了8－羥基喹啉、異硫*酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源RNase（RNA酶）。
※0.1%的8－羥基喹啉可以抑制RNase，與氯仿聯(lián)合使用可增強(qiáng)抑制作用。
※異硫*酸胍屬于解偶劑，是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑，可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)消失，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解，核蛋白迅速與核酸分離。
※β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質(zhì)中的二硫鍵。
TRIzol的使用方法:
用勻漿器將組織磨碎，加入TRIzol處理組織。5分鐘后加入氯仿，以每分鐘12000轉(zhuǎn)離心5分鐘，樣品即分成水樣層、中間層和有機(jī)層。
※RNA存在于水樣層中，收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀RNA來還原。
※在除去水樣層后，有機(jī)層中的DNA和蛋白質(zhì)也能相繼以沉淀的方式還原：乙醇能使中間層的DNA沉淀析出，在有機(jī)層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質(zhì)。
每100ml TRIzol可以抽提100個六孔板中的樣品或100個50-80mg的組織樣品。無論樣品是人、動物、植物還是細(xì)菌組織，該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(約五百萬個)及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(超過一千萬個)均有較好的分離效果。
每一百萬細(xì)胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA，每毫克組織用TRIzol抽提可得1-10微克RNA（產(chǎn)量因細(xì)胞和組織不同而異）。
TRIzol操作上的簡便性允許其同時處理多個樣品，所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。
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