牛鼻氣管炎抗體(BR-Ab)ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱: 牛鼻氣管炎抗體(BR-Ab)ELISA試劑盒
英文名稱: Bovine Rhinotracheitis antibody ELISA Kit
產(chǎn)品編號(hào):
產(chǎn)品價(jià)格: 0
產(chǎn)品產(chǎn)地: 美國
品牌商標(biāo): 進(jìn)口
更新時(shí)間: null
使用范圍: null
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牛鼻氣管炎抗體(BR-Ab)ELISA試劑盒?
牛鼻氣管炎抗體(BR-Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用? ?????目的:本試劑盒用于檢測(cè)牛血清,血漿及相關(guān)液體樣本中鼻氣管炎抗體(BR-Ab)水平,感染人的血液學(xué)診斷。
實(shí)驗(yàn)原理:
? 本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定標(biāo)本中牛鼻氣管炎抗體(BR-Ab)。用純化的牛鼻氣管炎(BR)包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中鼻氣管炎抗體(BR-Ab)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的鼻氣管炎(BR)結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中牛鼻氣管炎抗體(BR-Ab)的存在與否。
試劑盒組成:
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試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
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說明書 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
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密封袋 |
1個(gè) |
1個(gè) |
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酶標(biāo)包被板 |
1×48 |
1×96 |
2 |
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陰性對(duì)照 |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2 |
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陽性對(duì)照 |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2 |
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酶標(biāo)試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2 |
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濃縮洗滌液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2 |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1.???????? 編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.???????? 加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.???????? 溫育:用封板膜封板后置
4.TUNEology 波長可調(diào)檢測(cè)卡盒-->
