熱蛋白組分析TPP - PISA
產品名稱： 熱蛋白組分析TPP - PISA
英文名稱： Proteome Integral Solubility Alteration
產品編號： 2
產品價格：
產品產地： 湖北武漢
品牌商標： null
更新時間： 2025-11-21T11:00:47
使用范圍： null
| 規格 | 價格 |
| 樣 | 1500.0 |
- 聯系人 : 劉宜子
- 地址 : 武漢市東湖新技術開發區高新大道666號武漢國家生物產業(九峰創新)基地B5棟B024室
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- 所在區域 : 湖北省
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- 郵箱 : proteome@spec-ally.com
PISA原理與實驗流程
PISA的實驗流程與TPP類似（F2），設置實驗組與對照組，然后每組再細分成不同的溫度處理組。與TPP不同的是，TPP分析需要檢測實驗組和對照組中每個溫度處理組的蛋白質組定量結果，然后根據蛋白在實驗組和對照組中不同溫度點的定量水平繪制曲線，比較實驗組和對照組蛋白定量曲線的偏移（ΔTm）來篩選靶蛋白。PISA分析則是分別將實驗組和對照組各個溫度處理組的樣品混合起來定量檢測，然后比較實驗組和對照組蛋白的定量差異來篩選靶蛋白，這個時候實驗組和對照組蛋白的定量差異反映到曲線上就是兩條曲線在起始溫度點間的面積（ΔSm）。因為PISA方法將不同溫度處理的樣品混合成了一組，所以只有實驗組和對照組兩組，算上三次重復實驗進行統計學分析，僅需檢測六組樣品就可以實現目標。
譜度眾合推出的TPP藥物靶點篩選解決方案，包含以下幾種實驗方案：
經典流程TPP-TR（溫度梯度蛋白熱位移分析）
通過溫度梯度（Temperature Range, TPP-TR）實驗，構建蛋白熱熔曲線，分析藥物處理組與對照組間的蛋白熱位移（ΔTm），篩選潛在藥物作用靶點。
經典流程TPP-CCR（化合物濃度梯度蛋白熱位移分析）
通過化合物濃度梯度（Compound Concentration Range, TPP-CCR）實驗，構建蛋白熱熔曲線，分析最高濃度藥物處理樣本與對照樣本間發生顯著穩定性變化的蛋白，篩選潛在藥物作用靶點。
簡化流程TPP-ITSA（等溫位移分析）
通過等溫位移分析（Isothermal Shift Assay, ITSA）實驗，比較藥物處理組與對照組在單溫度刺激下的蛋白變性水平差異（熱穩定性變化），篩選潛在藥物作用靶點。
簡化流程TPP-PISA（蛋白質組積分溶解度改變）
通過蛋白質組積分溶解度改變（Proteome Integral Solubility Alteration, PISA）實驗，比較藥物處理組與對照組在多個溫度刺激下的混合樣本的蛋白變性水平差異（熱穩定性變化），篩選潛在藥物作用靶點。
1.6-10個給藥前樣本（藥物處理組與溶劑對照組各3-5個重復；如需增加不同濃度或者不同藥物處理組，每組增加3-5個樣本）。
2.實驗組與對照組每組細胞總量建議>1*10^7（組織樣本＞5mg）;藥物用量：1μmol左右粉末或10μL藥物母液（100×處理濃度）。
3.收集細胞/組織樣本時需以PBS清洗干凈，保留細胞沉淀/去浮水組織，樣本不含有任何去垢劑/變性劑成分。