總糖含量檢測試劑盒 微量法
產品名稱: 總糖含量檢測試劑盒 微量法
英文名稱: Total sugar content test kit
產品編號: BC2715- 100管/96樣
產品價格: 0
產品產地: 北京市通州區聯東U谷85A三層
品牌商標: solarbio
更新時間: null
使用范圍: null
北京索萊寶科技有限公司--實驗室產品
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總糖含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。
英文名稱:Total sugar content test kit
關鍵詞:總糖含量檢測|總糖含量測定|總糖含量|總糖
貨號:BC2715
規格:100T/96S
產品內容:
試劑一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存;
標準品:粉劑×1 支,10mg 無水葡萄糖,4℃保存;臨用前加 1mL 蒸餾水溶解為 10mg/mL 的葡萄糖標準品備用。
產品說明:
糖類物質是構成植物體的重要成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質??偺侵饕妇哂羞€原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在測定條件下能水解為還原性的單糖的蔗糖,麥芽糖以及可能部分水解的淀粉。
總糖酸水解為還原糖,還原糖在堿性條件下與 DNS 試劑共熱后被還原成氨基化合物,在堿性溶液中呈桔紅色,還原糖的量與桔紅色物質顏色的深淺成正比關系,以此測定樣品中的總糖含量。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品中總糖的提?。?/span>
組織:稱取約 0.1g 樣品,加入 1mL 試劑一,1.5mL 蒸餾水,勻漿,沸水浴 30min,加入 1mL
試劑二,混勻,用蒸餾水定容至 10mL,8000g 25℃離心 10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)
血清(漿)、液體體積:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.1mL 試劑一,0.15mL 蒸餾水,勻漿,沸水浴 30min,加入 0.1mL 試劑二,混勻,用蒸餾水定容至 1mL,8000g 25℃離心 10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)
二、測定操作表:
1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 540nm,蒸餾水調零。
2、標準品準備:將標準品用蒸餾水稀釋至 1.5、1、0.8、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1mg/mL。
3、加樣表:
試劑(μL) 空白管 測定管 標準管
蒸餾水???????30
樣本????????????????30
標準品 ????????????????????30
試劑三 ??????30?????30 ????30
混勻,沸水浴 10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫
蒸餾水 ??????180 ???180 ???180
混勻,取出 200μL 在 540nm 下測定吸光值,并計算?A 測=A 測定管-A 空白管、?A 標=A 標準管-A 空白管。
三、總糖含量計算:
1、標準曲線的繪制:
以標準管的濃度為x軸,對應的?A標為y軸繪制標準曲線,得到標準方程y=kx+b,將?A測帶入方程中計算得x(mg/mL)。
2、按樣本鮮重計算:
總糖(mg/g 鮮重)=(x×V 樣總)÷W×稀釋倍數=10×x÷W×稀釋倍數
3、按血清(漿)、液體體積計算:
總糖(mg/mL)=(x×V 提)÷V 樣×稀釋倍數=10×x×稀釋倍數
V 樣總:組織樣本總體積,10mL;
W:樣本鮮重,g;
V 提:血清或液體樣本總體積,1mL;
V 樣:血清或液體體積,0.1mL。
注意事項:
1、空白管只需做一管。
2、如果?A 大于 1.2,需要將上清液用蒸餾水稀釋,計算公式中乘以相應稀釋倍數。
3、此試劑盒對于纖維素的分解程度無法達到 100%。
注意:最低檢測限為 5mg/g 鮮重。
