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基因敲除小鼠

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產品名稱: 基因敲除小鼠

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更新時間: 2024-12-06T09:13:08

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基因敲除小鼠
? ? ?? 2013年1月份,美國兩個實驗室在《Science》雜志發表了基于Crispr-Cas9技術在細胞系中進行基因敲除的新方法,一種全新的人工核酸內切酶clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated(Cas)9出現,它主要是基于細菌的一種獲得性免疫系統改造而成,其特點是制作簡單,作用效果高。

技術原理:
? ? ???CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一種廣泛存在于細菌與古細菌中的,由RNA介導的可遺傳的獲得性免疫系統,這種免疫系統為宿主細胞提供了對外源DNA(如噬菌體質粒)的免疫功能。
? ? ? ?此系統的工作原理是CrRNA(CRISPR-derived RNA)通過堿基配對與tracrRNA (trans-activating RNA)結合形成tracrRNA/crRNA復合物,次復合物引導核酸酶Cas9蛋白在與CrRNA配對的序列靶位點剪切雙鏈DNA。而通過人工設計這兩種RNA,可以改造形成具有引導作用的SgRNA (short guide RNA),足以引導Cas9對DNA的定點切割。中喬新舟目前已經成功將此技術應用于大、小鼠基因KO/KI的模型制備,以及條件性敲除(Loxp系統)模型的制備。

CRISPR/Cas9技術特點:
? ? ? ?1、可實現對靶基因多個位點或多個基因同時敲除;
? ? ? ?2、可對基因進行定點修飾(Tag、GFP、RFP、點突、條件性敲除);
? ? ? ?3、試驗周期短、價格低、效率高;
? ? ? ?4、可應用于大、小鼠等。