鏈霉親和素包被微孔板（黑板）

保存條件：2-8℃避光干燥保存

1.產品簡介：

本產品采用Frdbio生物共價包被技術， 使鏈酶親和素( Streptavidin，SA)高密度定向共價偶聯到酶標板微孔內，排列均勻，穩定性高，不易脫落，這種板稱為SA Bioconjugate微孔板。此微孔板的Biotin最大結合量達到每孔6pmol，使用Biotin-IgG(Rabbit)的最低檢測限低至0.5 ng。

本產品可廣泛用于化學發光免疫分析、免疫沉淀及各類核酸、蛋白質雜交反應。

2.產品信息：

1）靈敏度：0.5ng/well（Rabbit Biotin-IgG）

2）包被體積：100uL

3）Biotin最大結合量：5pmol/well

4）保質期：短期內可2-8℃保存，長期使用請放置-20℃保存（2年左右）

3.產品應用范圍：

1）化學發光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)：酶標板可特異性地結合Biotin標記蛋白（抗原、抗體），可廣泛應用于夾心法、竟爭法或間接法化學發光ELISA實驗。

2）核酸雜交實驗：酶標板可特異性地結合Biotin標記的核酸探針，可廣泛應用于DNA、 RNA的雜交檢測實驗。

3）DNA-蛋白質相互作用研究實驗：酶標板可特異性地結合Biotin標記的靶點DNA片段，可用于分析基因表達調控中蛋白因子的作用位點，或者DNA結合蛋白的研究。

4.操作步驟：（參考實施例）

（說明書提供夾心法化學發光免疫分析的操作步驟，僅供參考。建議使用前每孔加入200ul PBST緩沖液或體系中使用到的其他洗滌緩沖液清洗1-2遍）

1）試劑準備(試劑需客戶自備)

(1)PBS-T：10 mM NaH2PO4，1 mM KH2PO4，137 mM NaCI， 3 mM KCI，0.05% Tween-20，pH7.4；

(2)生物素標記的抗體(捕獲抗體) ；

(3)酶標記或其他信號分子標記的抗體(檢測抗體)；

(4)牛血清白蛋白(BSA)。

2）生物素標記抗體與包被板的結合反應

(1)抗體的稀釋：用PBS-T將生物素標記抗體稀釋至1 ug/mL，置于冰上備用。

(2)抗體結合反應：向微孔中加入100uL稀釋后的生物素標記抗體，將微孔板放置于水平搖床上室溫振蕩孵育1~2h。

(3)洗滌:盡量吸去微孔中的液體，再加入200uL PBS-T，將微孔板放置于水平搖床上振蕩5 min，吸去微孔中的液體。重復此洗滌步驟3~5次。

3）封閉（此步驟可省略）

(1)封閉：向微孔加入100uL含5% BSA的PBS-T，將微孔板放置于水平搖床上室溫振蕩孵育1 h。

(2)洗滌：盡量吸去微孔中的液體，再加入200uL PBS-T，將微孔板放置于水平搖床上振蕩5 min，吸去微孔中的液體上清液。重復此洗滌步驟3~5次。

4）待測抗原的捕獲反應

(1)抗原樣品的稀釋：用PBS-T對含有待測抗原的樣品進行稀釋。ELISA的檢測范圍約為0.1~200ng/mL(視所用抗體-抗原配對的親和力的不同而有所不同)，請根據樣品中待測抗原的含量進行若干個不同倍數的稀釋。

(2)抗原的捕獲：向微孔中加入稀釋后的抗原100uL，將微孔板放置于水平搖床上室溫振蕩孵育1~3 h(或4℃靜置孵育過夜)。

(3)洗滌：盡量吸去微孔中的液體，加入200uL PBS-T，將微孔板放置于水平搖床上振蕩5 min，吸去微孔中的液體。重復此洗濠步驟3~5次。

5）抗體檢測反應

(1)酶標檢測抗體的稀釋：用含5%BSA的PBS-T對酶標檢測抗體進行稀釋，稀釋的倍數請參考酶標抗體的相關使用說明。

(2)檢測抗體與抗原的結合：向微孔中加入稀釋后的檢測抗體100uL，將微孔板放置于水平搖床上振蕩孵育1h。

(3)洗滌:盡量吸去微孔中的液體，加入200uL PBS-T，將微孔板放置于水平搖床上振蕩5 min，吸去微孔中的液體。重復此洗濠步驟3~5次。

(4)底物：請根據酶標抗體的使用說明加入魯米諾化學發光底物，并在化學發光儀上讀取對應的發光值結果。

注意事項

1）本產品長期使用需置于負20℃保存，開封后的微孔板應注意避光干燥保存。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

*本試劑僅供實驗室研究使用