臺盼藍檢測活性

正常的活細胞，胞膜結構完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍拒染現象。

臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數或顯微鏡下拍照后計數，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。并且操作非常簡單。

操作步驟

1.?用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液；

2.?用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液來消化培養的貼壁細胞；

3.?再加入適量Hanks液制成細胞懸液；

4.?將待染色細胞稀釋至所需濃度（方法及濃度范圍與細胞計數相同）；

5.?每0.1ml細胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴，室溫下染3—5min；

6.?染色過的細胞材料，取一滴細胞懸液置玻片上，加蓋玻片后放高倍鏡下觀察；

7.?死亡的細胞著淺藍色并膨大，無光澤?；罴毎恢⒈３终Ｐ螒B，有光澤；

8.?計數1000個細胞中的活細胞和死細胞數目；

9.?統計未染色細胞?？砂垂接嬎愠黾毎盥省?/span>

細胞活率（%）=未染色的細胞數/觀察的細胞總數×100

注意事項

1.?染色時間不能太長，否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使監測結果偏低；

2.?另可結合細胞計數方法，同時進行細胞計數和活力檢測。

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