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?MTT（四唑藍）比色法是是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。在一定細胞數范圍內，MTT結晶形成的量與細胞數成正比。MTT法廣泛用于抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗等研究。
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實驗方法：
? ? ? ? 1.?收集對數生長期細胞，調整細胞懸液濃度，每孔加入50μl鋪板使待測細胞調密度?5000-?7500細胞/?孔。
? ? ? ? 2.??5%CO2，37℃孵育過夜，倒去培養液，加入濃度梯度的藥物。每個藥物設9個濃度梯度（30μmol/L,10μmol/L,3.33μmol/L,1.11μmol/L,0.37μmol/L,0.123μmol/L, 0.041μmol/L, 0.0137μmol/L, 0μmol/L），每孔50μl，每個濃度設2個重復，同時設DMSO和陽性藥物（Taxol/Gemcitabine）對照組。
? ? ? ?3. ?5%CO2，37℃孵育72小時。
? ? ? ?4.?倒掉含藥培養基，每孔加入100μl?用無血清培養基配制的終濃度1mg/ml MTT?溶液，繼續培養4h。
? ? ? ?5. ?每孔加入溶解液25%SDS (Sodium Dodecyl Sulfate十二烷基硫酸鈉)+50%DMF 100μl，37℃孵育過夜。
? ? ? ?6.?用synergy 4多功能讀板機于OD570nm讀取各孔的吸光值。
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統計學分析
? ? ? ???1．分析軟件 ? ??Excel，GraphPad Prism 5
? ? ? ? 2. ?數據分析?? ?
?（1）計數資料以均值±標準差表示，結果采用單因素方差分析（ANOVA）。
? ? ??（2）各種樣品的IC50曲線用GraphPad Prism 5軟件進行分析生成。
? ? ? ? ? ? 樣品對腫瘤細胞生長的抑制百分比為：
??（樣品孔OD值-空白孔OD均值）/（陰性對照孔OD值-空白孔OD均值）*100%
??（3）樣品對腫瘤細胞生長的抑制百分比進行非線性回歸分析，按以下方程進行擬合，得到樣品的濃度-效應依賴性曲線。
Y = 1/(1?+?10(log IC50???X)?× HillSlope)
? ? ? ? ? ? ? ? ? ??其中IC 50為抑制腫瘤生長50%的樣品濃度。