來源
用途
交叉反應性
抗體識別位點
Histone H3分子量
Rabbit
WB, IF
H
Histone H3 N-terminal
～17kD
??????WB, Western blot; IF, Immunofluorescence.
??????H, human.
??????本Histone?H3抗體(Histone?H3?antibody)為進口分裝，用人工合成的人histone?H3氨基端aa 1-20該段多肽進行適當修飾后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽親和柱經過兩步純化得到的高純度抗體。
??????本Histone H3抗體識別的是總histone H3(total histone H3)，可檢測內源性的Histone H3，未發現和其它組蛋白有交叉反應。
??????組蛋白histone H2A，H2B，H3和H4各兩個分子組成的八聚體和與該八聚體相結合的DNA構成了染色質的基本結構核小體
(necliosome)。組蛋白的存在確保了基因組DNA可以被相對致密而有序地堆放在細胞核中。人一個細胞的基因組DNA完全拉成線性的總長度約為1.4米，但染色質的總長度僅為9厘米，而有絲分裂時染色體的總長度僅為0.12毫米。除了核心組蛋白(core?
histone)histone?H2A，H2B，H3和H4外，還有一類linker?histone?H1和H5。Histone?H1可以結合核小體和DNA在核小體中進出的位點，從而使DNA的位置被鎖定，有利于在核小體基礎上形成更高級的空間結構(參考下圖)。組蛋白結合區域的DNA長度為147bp，核小體間的DNA長度大約為50bp。染色質空間結構的松散還是致密很大程度上決定了該區域基因轉錄水平的高低(參考下圖)。
??????組蛋白是真核生物中呈強堿性的蛋白。組蛋白可以被乙?；?、磷酸化、甲基化和泛素化修飾。這些修飾會改變染色質的空間結構，從而在基因轉錄調控、染色體裝配等過程中起重要作用。通常，histone H2B的Lys5，Lys12和Lys15會發生乙?；揎?。
Histone?H3的Lys9，Lys14，Lys18和Lys23會發生乙?；揎?。Histone?H3的Ser10，Ser28和Thr11都會發生磷酸化修飾。Histone H3的這些磷酸化和有絲分裂或減數分裂過程中的染色質濃縮密切相關。Histone?H3?Thr3的磷酸化在很多物種中都非常保守，可以被激酶haspin所催化。Histone?H3的Thr3磷酸化發生在有絲分裂早期(prophase)，在有絲分裂的晚期(anaphase)則被去磷酸化。Histone?H3和H4是甲基化修飾的主要組蛋白，哺乳動物細胞中histone?H3和H4是高度甲基化的。組蛋白可以被單、雙或三甲基化(mono-, di-, and tri-methylated)，和基因轉錄調控和染色體裝配密切相關。
??????Histone?H3在其氨基端有一個較長的N?terminal?tail，在核小體的裝配過程中起關鍵作用。Histone H3是各種histone中修
飾程度最高的，在表觀遺傳(epigenetics)中起重要作用。Histone?H3包括H3A1、H3A2和H3A3。人的hitone H3由近15個基因
分別單獨編碼。
??????配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
??????建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整)：
WB
IF
1:1000
1:100
??????本抗體如果用于常規的Western檢測，至少可以檢測30次。
包裝清單：
產品編號
產品名稱
包裝
AH433-1
Histone H3抗體(兔多抗)
30μl
AH433-2
Western一抗稀釋液
30ml
—
說明書
1份
保存條件：
??????Histone H3抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項：
??????在Western實驗后，請注意回收稀釋的抗體?；厥盏目贵w在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體，包括已經使用過的稀釋抗體，4℃保存。
??????回收后重復使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發現抗體出現輕微混濁現象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續檢測。如果回收的抗體出現明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
? ? ? 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. Western檢測：
A. 按照1:1000用提供的Western一抗稀釋液稀釋抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜或室溫緩慢搖動2小時，確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗，4℃保存以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。
2. 免疫染色：
可以使用生產的免疫染色一抗稀釋液(P0103)稀釋抗體，使用后注意回收稀釋好的一抗，
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。?