PCR清潔試劑盒
產品名稱: PCR清潔試劑盒
英文名稱: PCR Purification Kit
產品編號: 2101050
產品價格: 0
產品產地: 中國
品牌商標: simgen
更新時間: null
使用范圍: null
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·10-15分鐘(三個步驟)內即可完成DNA的清潔回收。??????????????????????????????????????????? 
·最高可以達到95%的回收效率。
·核酸純化柱無須平衡液處理,可最大吸附10 μg DNA。
適用于從含有雜質的DNA溶液中回收100bp-10kb的DNA。
·10-15分鐘(三個步驟)內即可完成DNA的清潔回收。
·最高可以達到95%的回收效率。
·核酸純化柱無須平衡液處理,可最大吸附10 μg DNA。
·溶液中所含的pH指示劑可直觀地判斷溶液中DNA與硅膠膜的最適宜結合條件。
·起始樣品:酶反應體系或者含有雜質(比如鹽份和酚/氯仿殘留、糖原或多糖殘留、蛋白質殘留等)的DNA?? 溶液。
·可用30-50 μl微量洗脫體積洗脫DNA。·所需儀器:可適合2ml離心管使用的離心機。???????????????????????????????????????????????????????????????? 
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右圖:
30 μl 100 bp DNA Marker經Simgen PCR清潔試劑盒清潔后,用30μl Buffer TE洗脫(A,B,C),與未清潔的DNAMarker(50%,100%)對照各個片段的回收效率。
1.5% TAE?瓊脂糖凝膠
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產品原理:
硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA,又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性,所以被分離除去。結合在純化柱上的DNA經洗滌液洗滌后,即可回收到高純度的DNA。
操作步驟
在需要清潔的DNA溶液中加入結合緩沖液,混勻后加入到核酸純化柱中,經過離心步驟使DNA結合到純化柱上,其他雜質則被過濾出去。經清洗液洗滌一次純化柱上的DNA后,DNA即可被TE溶液洗脫下來。
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- DNA測序
- 基因芯片分析
- DNA連接與轉化
- 限制性酶切
- 標記
- 微注射
- PCR?
- 體外轉錄
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常見問題分析
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1.?????回收不到DNA或者DNA的回收效率低
可能的原因:
1)????? Buffer WG或Buffer WB中未加入無水乙醇,應按比例補加無水乙醇。如果是錯誤地加入了其他試劑,請向我公司技術部尋求幫助。
2)????? Buffer WG或Buffer WB中錯誤地加入了70%乙醇。請向我公司技術部尋求幫助。
3)????? DNA的洗脫效率差。參考第3頁柱純化技術中的第4點“洗脫DNA”內容優化DNA的洗脫方案。
4)將溶液加入到純化柱前應觀察BufferG或Buffer P是否保持著原來的橙黃色,如果溶液變為紫紅色,必須加入約10 μl 3 M醋酸鈉(pH 5.0)使溶液恢復至原來的橙黃色,否則將嚴重影響DNA結合到純化柱上。
僅凝膠回收:
5)制作的凝膠從加樣孔至DNA泳動方向呈現為一個降低的斜面,DNA在泳動的過程中大量地流失到電泳緩沖液中。制作瓊脂糖凝膠時應注意放平制膠槽,并加入足夠量的凝膠液。
6)凝膠沒有完全被溶解,DNA仍保留在未溶解的凝膠中。在50°C溶膠時每隔2-3分鐘請將離心管漩渦振蕩數秒以幫助凝膠徹底溶解。
7)在凝膠溶解后的溶液中加入異丙醇出現霧狀沉淀。出現該種現象主要是因為凝膠沒有被徹底溶解,此時應注意不要省略后續的Bufffer G的洗滌步驟,并且加入BufferG到純化柱中后室溫靜置1分鐘,以增強對未溶解的凝膠的洗滌效果。
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2.????回收的DNA生物學活性差
1)??回收的DNA中鹽分殘留量過高。向純化柱中加入BuffferWG或者Bufffer WB后,室溫靜置5分鐘后再離心,可最大程度地洗去純化柱上殘留的鹽分。
2)??回收的DNA中乙醇殘留量過高。注意不可省略高速空離(14000 rpm?離心1分鐘)步驟。
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