PCR清潔試劑盒-核酸純化-試劑-生物在線
杭州沃森生物技術有限公司
PCR清潔試劑盒

PCR清潔試劑盒

商家詢價

產品名稱: PCR清潔試劑盒

英文名稱: PCR Purification Kit

產品編號: 2101050

產品價格: 0

產品產地: 中國

品牌商標: simgen

更新時間: null

使用范圍: null

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·10-15分鐘(三個步驟)內即可完成DNA的清潔回收。???????????????????????????????????????????

·最高可以達到95%的回收效率。

·核酸純化柱無須平衡液處理,可最大吸附10 μg DNA。

適用于從含有雜質的DNA溶液中回收100bp-10kb的DNA。

·10-15分鐘(三個步驟)內即可完成DNA的清潔回收。

·最高可以達到95%的回收效率。

·核酸純化柱無須平衡液處理,可最大吸附10 μg DNA。

·溶液中所含的pH指示劑可直觀地判斷溶液中DNA與硅膠膜的最適宜結合條件。

·起始樣品:酶反應體系或者含有雜質(比如鹽份和酚/氯仿殘留、糖原或多糖殘留、蛋白質殘留等)的DNA?? 溶液。

·可用30-50 μl微量洗脫體積洗脫DNA。

·所需儀器:可適合2ml離心管使用的離心機。????????????????????????????????????????????????????????????????

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右圖:
30 μl 100 bp DNA Marker
Simgen PCR清潔試劑盒清潔后,用30μl Buffer TE洗脫(A,B,C),與未清潔的DNAMarker50%,100%)對照各個片段的回收效率。
1.5% TAE?
瓊脂糖凝膠


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產品原理:
硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA,又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性,所以被分離除去。結合在純化柱上的DNA經洗滌液洗滌后,即可回收到高純度的DNA。

操作步驟
在需要清潔的DNA溶液中加入結合緩沖液,混勻后加入到核酸純化柱中,經過離心步驟使DNA結合到純化柱上,其他雜質則被過濾出去。經清洗液洗滌一次純化柱上的DNA后,DNA即可被TE溶液洗脫下來。

適用的分子生物學實驗

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  • DNA測序
  • 基因芯片分析
  • DNA連接與轉化
  • 限制性酶切
  • 標記
  • 微注射
  • PCR?
  • 體外轉錄

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常見問題分析

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1.?????回收不到DNA或者DNA的回收效率低

可能的原因

1????? Buffer WGBuffer WB中未加入無水乙醇,應按比例補加無水乙醇。如果是錯誤地加入了其他試劑,請向我公司技術部尋求幫助。

2????? Buffer WGBuffer WB中錯誤地加入了70%乙醇。請向我公司技術部尋求幫助。

3????? DNA的洗脫效率差。參考第3頁柱純化技術中的第4洗脫DNA內容優化DNA的洗脫方案。

4)將溶液加入到純化柱前應觀察BufferGBuffer P是否保持著原來的橙黃色,如果溶液變為紫紅色,必須加入約10 μl 3 M醋酸鈉(pH 5.0)使溶液恢復至原來的橙黃色,否則將嚴重影響DNA結合到純化柱上。

僅凝膠回收:

5)制作的凝膠從加樣孔至DNA泳動方向呈現為一個降低的斜面,DNA在泳動的過程中大量地流失到電泳緩沖液中。制作瓊脂糖凝膠時應注意放平制膠槽,并加入足夠量的凝膠液。

6)凝膠沒有完全被溶解,DNA仍保留在未溶解的凝膠中。在50°C溶膠時每隔2-3分鐘請將離心管漩渦振蕩數秒以幫助凝膠徹底溶解。

7)在凝膠溶解后的溶液中加入異丙醇出現霧狀沉淀。出現該種現象主要是因為凝膠沒有被徹底溶解,此時應注意不要省略后續的Bufffer G的洗滌步驟,并且加入BufferG到純化柱中后室溫靜置1分鐘,以增強對未溶解的凝膠的洗滌效果。

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2.????回收的DNA生物學活性差

1)??回收的DNA中鹽分殘留量過高。向純化柱中加入BuffferWG或者Bufffer WB后,室溫靜置5分鐘后再離心,可最大程度地洗去純化柱上殘留的鹽分。

2)??回收的DNA中乙醇殘留量過高。注意不可省略高速空離(14000 rpm?離心1分鐘)步驟。

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