抗體酵母展示服務(wù)
產(chǎn)品名稱： 抗體酵母展示服務(wù)
英文名稱： 抗體酵母展示服務(wù)
產(chǎn)品編號(hào)： 抗體酵母展示服務(wù)
產(chǎn)品價(jià)格： 詢價(jià)
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： 2024-06-10T15:23:59
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 劉經(jīng)理
- 地址 : 天津市武清開發(fā)區(qū)暢源道國(guó)際企業(yè)社區(qū)
- 郵編 : 301700
- 所在區(qū)域 : 天津
- 電話 : 189****5432 點(diǎn)擊查看
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- 郵箱 : info@tekbiotech.com
泰克生物致力于為客戶提供高親和力、高特異性的抗體藥物前期發(fā)現(xiàn)技術(shù)服務(wù)，為客戶的后續(xù)的CAR-T/CAR-NK先導(dǎo)序列設(shè)計(jì)、抗體人源化、藥物靶點(diǎn)抗體開發(fā)、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）開發(fā)、雙特異性抗體開發(fā)以及高效阻斷型中和抗體開發(fā)等下游研發(fā)工作提供有力支持。泰克生物在藥物抗體發(fā)現(xiàn)方面擁有10年的項(xiàng)目開發(fā)經(jīng)驗(yàn)和心得，能夠?yàn)榭蛻籼峁└哔|(zhì)量的針對(duì)包括但不限于蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白以及mRNA等靶點(diǎn)的駝源VHH發(fā)現(xiàn)服務(wù)以及不同物種（兔源、鼠源、羊源和駝源等）scFv發(fā)現(xiàn)服務(wù)。
酵母抗體展示技術(shù)（Yeast Display Technology）是指用抗體序列可變區(qū)與凝集素Aga2p融合表達(dá)，Aga2p蛋白亞基通過兩個(gè)二硫鍵與固定在酵母細(xì)胞壁上的Aga1p 蛋白亞基結(jié)合，結(jié)合流式分選技術(shù)，將靶向抗原的特異性抗體篩選出來。基于酵母體展示技術(shù)（Yeast Technology），泰克生物能夠?yàn)榭蛻籼峁└哔|(zhì)量的包括但不限于VHH、scFv等單鏈抗體酵母展示服務(wù)，且酵母文庫(kù)庫(kù)容可達(dá)10^8，文庫(kù)多樣性、插入率、陽性率均可達(dá)90%以上，滿足各類客戶對(duì)于抗體酵母展示文庫(kù)的質(zhì)量要求。同時(shí)，泰克生物還能提供抗體酵母展示配套的下游抗體體外驗(yàn)證（包括但不限于親和力驗(yàn)證、抗體阻斷驗(yàn)證、交叉反應(yīng)驗(yàn)證等多種下游驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)）、抗體人源化、抗體親和力成熟、CAR-T/CAR-NK先導(dǎo)序列設(shè)計(jì)及細(xì)胞殺傷驗(yàn)證等一站式技術(shù)服務(wù)，客戶只需要提供具體的實(shí)驗(yàn)需求和靶點(diǎn)信息，泰克生物的科學(xué)家均能夠根據(jù)客戶的需求進(jìn)行合理的方案設(shè)計(jì)和個(gè)性化定制，為客戶的科研項(xiàng)目及藥物抗體開發(fā)助力。
█ 酵母展示抗體文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)
泰克生物擁有2個(gè)動(dòng)物免疫基地，保證客戶項(xiàng)目中免疫的動(dòng)物背景來源清晰且健康。VHH分子量大小約15kDa，是駝源動(dòng)物特有的一種抗體重鏈可變區(qū)，免疫原性低且穩(wěn)定性高，易獲得高親和力、高特異性及有效阻斷性的中和抗體，在藥物靶點(diǎn)抗體開發(fā)、CAR-T/CAR-NK治療（目前被廣泛應(yīng)用于CAR-T/CAR-NK治療性抗體，主要以駝源VHH抗體（又被稱為納米抗體）為主）等方面具有天然的優(yōu)勢(shì)。酵母展示文庫(kù)相對(duì)噬菌體展示文庫(kù)技術(shù)而言，前者在微量抗體表達(dá)后抗體活性層面相較于后者要高，得益此基礎(chǔ)，在流式篩選時(shí)就能區(qū)分抗體的親和力高低。
█ 服務(wù)內(nèi)容和周期
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步驟 |
服務(wù)內(nèi)容 |
QC標(biāo)準(zhǔn) |
周期 |
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Step1：抗原準(zhǔn)備 |
*抗原類型： (1) 重組蛋白制備 (2) 小分子（改造）+偶聯(lián) (3) 多肽合成+偶聯(lián) (4) 客戶提供滅活病毒 (5) 客戶提供封裝好的mRNA |
抗原QC標(biāo)準(zhǔn)： 重組蛋白3-3.5mg(純度>85%)； 小分子純度>90%； 多肽純度>90%；
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4-6周 |
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Step2:動(dòng)物免疫 |
(1) 動(dòng)物免疫4次，加強(qiáng)免疫一針，共計(jì)免疫5針； (2) 免疫前采集陰性血清，第4針采血進(jìn)行ELISA檢測(cè)血清效價(jià)； (3) 若第4針血清抗體效價(jià)滿足要求，則采血前7天再次加強(qiáng)免疫1針，如不滿足要求，則繼續(xù)常規(guī)免疫； (4) 效價(jià)合格，采血分離單核細(xì)胞； |
動(dòng)物：背景清晰（年齡，性別，防疫情況）； 免疫：蛋白/病毒抗原效價(jià)>10^5；多肽/小分子抗原效價(jià)>10^4； |
10周 |
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Step3:模板cDNA制備 |
(1) PBMC總RNA提取（RNA提取試劑盒） (2) 高保真RT-PCR制備cDNA（反轉(zhuǎn)錄試劑盒） |
cDNA：膠圖分布均勻； |
1 天 |
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Step4:抗體酵母展示文庫(kù)構(gòu)建 |
(1) 以文庫(kù)cDNA為模板，兩輪PCR法擴(kuò)增VHH基因 (2) 酵母展示載體構(gòu)建與轉(zhuǎn)化： VHH基因拼接酵母展示載體，電擊轉(zhuǎn)化酵母菌，構(gòu)建抗體庫(kù) (3) 鑒定：隨機(jī)挑選48個(gè)克隆，PCR鑒定陽性率;測(cè)序計(jì)算插入正確率和文庫(kù)多樣性 |
文庫(kù)陽性率：>90%； 文庫(kù)插入性率：>90%； 文庫(kù)多樣性>90% 庫(kù)容：10^7-10^8 |
3-4周 |
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Step5:文庫(kù)篩選 |
(1) 默認(rèn)3輪篩選：熒光標(biāo)記蛋白FACS篩選； (2) 第三輪產(chǎn)物進(jìn)行NGS測(cè)序；同時(shí)挑單克隆誘導(dǎo)表達(dá)+ELISA檢測(cè)陽性克隆； (3) 挑取全部陽性克隆進(jìn)行基因測(cè)序； |
陽性標(biāo)準(zhǔn)：FACS和ELISA雙陽性菌株； VHH篩選標(biāo)準(zhǔn)：CDR氨基酸序列不同 |
3-4周 |
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Step6:抗體驗(yàn)證 |
(1) 抗體序列構(gòu)建合適的表達(dá)載體進(jìn)行表達(dá)+親和純化+抗體定量； (2) ELISA驗(yàn)證抗體與抗原結(jié)合（交付EC50數(shù)據(jù)）; (3) BLI法驗(yàn)證抗體親和力； (4) 細(xì)胞功能驗(yàn)證：流式阻斷驗(yàn)證； |
重組抗體1mg，純度90%； 快速親和力測(cè)定結(jié)果； 阻斷驗(yàn)證結(jié)果； |
4-6周 |
█ 服務(wù)優(yōu)勢(shì)
-- 多種駝源免疫可供選擇
-- 擁有免疫基地：動(dòng)物資源充足，包括但不限于駝源、鼠源、兔源以及羊源等
-- 多種抗體庫(kù)酵母展示可選：VHH抗體庫(kù)展示、scFv抗體庫(kù)展示等
-- 多種靶點(diǎn)抗體發(fā)現(xiàn)服務(wù)可選：蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白、mRNA等
-- 技術(shù)平臺(tái)成熟：庫(kù)容可達(dá)10^7-10^8，插入率均滿足>95%，篩選獲得的抗體親和力普遍處于nM-pM級(jí)別
-- 高標(biāo)準(zhǔn)交付：效價(jià)保證、文庫(kù)質(zhì)量保證、高親和力和高特異性抗體保證，為客戶的下游實(shí)驗(yàn)提供有力支持
-- 實(shí)驗(yàn)記錄可追溯：QC質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)（免疫效價(jià)、PBMC質(zhì)控、文庫(kù)質(zhì)控及篩選驗(yàn)證質(zhì)控），中英文實(shí)驗(yàn)報(bào)告，原始實(shí)驗(yàn)記錄
-- 可提供一系列配套的下游藥物抗體開發(fā)服務(wù)，抗體體外表達(dá)驗(yàn)證、抗體人源化、抗體親和力成熟、雙特異性抗體開發(fā)、CRA-T先導(dǎo)序列分子設(shè)計(jì)、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）開發(fā)等
-- 一對(duì)一個(gè)性化方案定制，滿足各類客戶的科研項(xiàng)目需求