MSCgo™成骨誘導分化試劑
產品名稱： MSCgo™成骨誘導分化試劑
英文名稱： MSCgo™ Osteogenic
產品編號： 05-440，05-442
產品價格： 0
產品產地： 以色列
品牌商標： Biological industries（BI）
更新時間： null
使用范圍： null
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產品描述
MSCgo? Osteogenic Differentiation Medium間質干細胞成骨誘導分化培養基，無血清，無異源，即用型完全培養基，誘導hMSC分化為成熟成骨細胞。適用于不同來源的hMSC，如骨髓、脂肪組織和臍帶組織（hMSC-BM，hMSC-AT，hMSC-CT）。
MSCgo? Rapid Osteogenic Differentiation Medium?10天以內快速誘導成骨，而MSCgo? OsteogenicDifferentiation Medium需要14-21天。
成骨結果
hMSC分化成骨后會礦化形成鈣結節且有鈣分泌，所以可以利用茜素紅S (Alizarin Red S) 染色檢視分化的成骨細胞。不同的細胞來源 (類型、年齡、代數)所得到的分化效果會有差異
試劑盒組成
MSCgo?間質干細胞成骨誘導分化培養基
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產品描述 |
儲存 |
貨號 |
規格 |
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MSCgo? ? Osteogenic Differentiation ? Medium |
2-8°C |
05-440-1B |
100ml |
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MSCgo? Rapid ? Osteogenic Differentiation Medium |
2-8°C |
05-442-1B |
100ml |
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成骨實驗所需材料
維持培養基
MSC NutriStem? XF Medium: BI；05-200-1，05-201-1
MSC Attachment solution XF : BI；05-752-1
??注：若您有MSC血清或者其他培養試劑也可使用。
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分化培養基
MSCgo? Osteogenic?Differentiation Medium：BI；05-440-1
MSCgo? Rapid Osteogenic Differentiation Medium：BI；05-442-1
染色試劑（可選）
Alizarin Red S (ARS), Sigma; A-5533，建議選擇Vivacell品牌，間充質干細胞成骨分化染色試劑盒，貨號：C37C00150。
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成骨誘導分化操作
1??????接種hMSC：用MSC Attachment solution (BI；P/N: 05-752-1，1:100 DPBS 稀釋) 預包被24孔盤，每孔加入0.5ml MSC NutriStem??XF，接種6x104細胞 (3x104?cells/cm2)。
??此處僅為針對成骨誘導的細胞接種操作，MSC NutriStem??XF Medium詳細操作步驟請參考其說明書。
??若使用血清或者其他試劑方式培養MSC，可以略過包被步驟。
2??????置于37°C，5% CO2細胞培養箱中培養。
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以成骨分化培養基誘導分化
1??????培養24h后確認細胞融合度達到80-90%，將維持培養基吸除，每孔（24孔盤）加入0.5ml分化培養基。
??注：若細胞融合度<80%，繼續再培養一天。
2??????置于37°C，5% CO2培養箱中培養10-21天，每2-3天換液。
??注：培養時間越長，會有越多礦化的細胞，ARS染色更明顯。
3??????成骨評價：使用2%的ARS染色液。
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ARS?染色分析 （可選）
制備2% ARS染色液
???注意：染色液需新鮮制備，或調節到pH 4.1-4.3
l??將2g ARS (Sigma；A-5533) 溶解到100ml 蒸餾水中。
l??用0.1N HCl 或 0.5% (v/v) NH3調節到pH?4.1-4.3。
l??混合均勻，用0.45 μmCA 注射器(如：Minisart16555)過濾。
l??溶液置于2-8°C儲存一年。
l??使用前需再確認pH值，如有必要用0.1N HCl 或 0.5% (v/v) NH3調節到pH?4.1-4.3。
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ARS?染色過程
l??吸除培養基，用DPBS（BI; 02-023-1）洗一次（1ml/well）
l??固定：吸除DPBS，每孔加入1ml 70% EtOH。
l??室溫固定30-60分鐘。
l??吸除EtOH，用蒸餾水洗滌3次（1ml/well）。
l??吸除蒸餾水，每孔加入1ml 2% ARS 染色工作液。
l??室溫靜置30-60分鐘。
l??吸除染色液，用1ml 蒸餾水洗滌4次（1ml/well）。
??注意：細胞分泌的鈣會洗脫掉，鈣化結節會被染色。
l??每孔加入1ml 蒸餾水避免細胞干燥。
l??觀察成骨染色效果、圖像采集及進行成骨評價。
??注意：成骨細胞含鈣會被ARS染成橘紅色。
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半定量ARS 染色 （可選）
l??每孔用0.5ml 10% (w/v in DDW) CPC（Cetyl Pyridinium Chloride） 洗滌ARS染料。
l??室溫下靜置1小時。
l??550nm?測OD值（10% CPC作為空白對照）。(150μl/well; 96w/p)
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產品官網鏈接：https://www.bioind.com/worldwide/mscgo-osteogenic-differentiation-medium/