快速內切酶NdeI

貨號：Q2100?

規格：200T

保存：-20℃保存，有效期2年。

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5...C A T A T G...3

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3...G T A T A C...5

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同裂酶：?FauNDI

注：同裂酶對于不同的甲基化修飾也許具有不同敏感性。

產品組成：

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產品說明：

快速內切酶是一系列經過基因工程重組、能夠在 5~15 分鐘內精確完成 DNA 切割的限制性內切酶，適用于質粒DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切?？焖賰惹忻缚焖賰惹忻妇哂腥缦绿攸c：5~15 分鐘內即可完成酶切；共用一種酶切 Buffer，大大簡化酶切反應體系；良好的酶活冗余度，輕松應對底物過量或困難模板酶切。此外，去磷酸化、連接試劑在 Reaction?酶切 Buffer 中具有 100% 活性，支持一管化反應，提升“酶切—修飾—連接”的體驗。

建議反應條件：1× Reaction 緩沖液；37℃溫育；參照“DNA 快速酶切流程”配制反應體系。

失活條件：80℃ 溫育 20 min。

產品應用： ?

1.?DNA 快速酶切流程

①冰上按照下表配制反應體系：

a. 本體系適用于經過純化的 PCR 產物酶切。未純化的 PCR 產物具備一定的離子強度，10× Reaction Buffer 加入量可適當減少至 2μl。但由于 DNA 聚合酶同時具有外切酶活性，會影響酶切產物，因此如下一步需進行克隆等操作，建議酶切前對 PCR ?產物進行純化。

② 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時離心以收集掛壁液滴；

③ 37℃溫育 15 min（質粒），或 15~30 min（PCR 產物），或 30~60 min（基因組 DNA）；

④ 80℃溫育 20 min 即可使酶失活，停止反應（可選）。

2. 雙酶切或多酶切

① 每種快速內切酶的用量為 1 μl，并根據需要適當擴大反應體系；

② 所有快速內切酶的體積總和不得超過總反應體系的 1/10；

③ 如果所用的幾種快速內切酶的最適反應溫度不同，應先以最適溫度低的酶開始酶切，再添加最適溫度較高的酶，在其最適反應溫度下進行酶切反應。