INVSC1 酵母感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.產品簡介：

INVSc1菌株是專門用來做重組蛋白表達的宿主酵母，pYES2質粒 與INVSc1酵母配套使用，激活pYES2質粒的GAL1啟動子的轉錄進而啟動下游重組蛋白的表達。INVSc1為合子型，可直接通過 PEG/LiAc將pYES2質粒轉化進入INVSc1細胞內。質粒pYES2的篩 選標志為URA，可用SD-URA板進行篩選。INVSc1感受態細胞經特 殊工藝制作，pYES2質粒檢測轉化效率>10⁴ cfu/μg DNA

基因型：MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52

2.使用說明：

1).取一支無菌的1.5ml EP管，依次加入預冷的目的質粒1-3μg, Carrier DNA 10μl(95-100℃ 5min快速冰浴，重復一次)，100μl冰.上融化的INVSC1感受態細胞，PEG/LiAc 500ul， 輕輕翻轉混勻6-8次;

2).30℃ 水浴30min，每10min輕輕翻轉混勻6-8次;

3).每支加入20ul的二甲基亞砜; (用于提高轉化效率，可不做)

4).42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉混勻6- 8次;

5).12000rpm瞬時離心棄上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃復蘇1h; (用于提高轉化效率， 可不做)

6).12000rpm瞬時離心棄上清，用100ul 0.9% NaCl 重懸，涂板,30℃培養48 - 96h。

3.注意事項：

1).感受態細胞最好在冰上融化,。

2). PEG溶液在低溫環境下會析出，請于常溫下完全溶解后使用。

3).INVSC1酵母菌株對高溫敏感，最適生長溫度為27-30℃;高于31℃，生長速度和轉化效率呈指數下降。

*本試劑僅供實驗室研究使用