INVSC1?酵母感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品名稱: INVSC1?酵母感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱: INVSC1?酵母感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品編號: MCC0209
產(chǎn)品價格:
產(chǎn)品產(chǎn)地: null
品牌商標(biāo): Frdbio
更新時間: 2024-03-01T10:40:26
使用范圍: null
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
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INVSC1 酵母感受態(tài)細(xì)胞
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產(chǎn)品編號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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MCC0209 |
INVSC1 酵母感受態(tài)細(xì)胞 |
100μl*10 |
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Carrier DNA |
5ug/μl;100 μl /-20℃ |
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PEG/LiAc |
5 ml /4℃ |
保存條件:-80℃。
1.產(chǎn)品簡介:
INVSc1菌株是專門用來做重組蛋白表達(dá)的宿主酵母,pYES2質(zhì)粒 與INVSc1酵母配套使用,激活pYES2質(zhì)粒的GAL1啟動子的轉(zhuǎn)錄進(jìn)而啟動下游重組蛋白的表達(dá)。INVSc1為合子型,可直接通過 PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)入INVSc1細(xì)胞內(nèi)。質(zhì)粒pYES2的篩 選標(biāo)志為URA,可用SD-URA板進(jìn)行篩選。INVSc1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特 殊工藝制作,pYES2質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA
基因型:MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
2.使用說明:
1).取一支無菌的1.5ml EP管,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒1-3μg, Carrier DNA 10μl(95-100℃ 5min快速冰浴,重復(fù)一次),100μl冰.上融化的INVSC1感受態(tài)細(xì)胞,PEG/LiAc 500ul, 輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
2).30℃ 水浴30min,每10min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
3).每支加入20ul的二甲基亞砜; (用于提高轉(zhuǎn)化效率,可不做)
4).42℃水浴15min,每5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6- 8次;
5).12000rpm瞬時離心棄上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃復(fù)蘇1h; (用于提高轉(zhuǎn)化效率, 可不做)
6).12000rpm瞬時離心棄上清,用100ul 0.9% NaCl 重懸,涂板,30℃培養(yǎng)48 - 96h。
3.注意事項:
1).感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化,。
2). PEG溶液在低溫環(huán)境下會析出,請于常溫下完全溶解后使用。
3).INVSC1酵母菌株對高溫敏感,最適生長溫度為27-30℃;高于31℃,生長速度和轉(zhuǎn)化效率呈指數(shù)下降。
*本試劑僅供實驗室研究使用
