組織及血液酸性磷酸酶測定試劑盒 微量法
產品名稱: 組織及血液酸性磷酸酶測定試劑盒 微量法
英文名稱: Micro Tissue and Blood Acid Phosphatase(ACP)Assay Kit
產品編號: BC2135
產品價格: 0
產品產地: 北京市通州區馬駒橋聯東U谷85A三
品牌商標: Solarbio
更新時間: 2026-04-10T08:58:12
使用范圍: null
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產品內容:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體30mL×1瓶,4℃避光保存,變成藍綠色不能使用。
標準品:液體1mL×1支,1μmol/mL酚標準液,4℃保存。
產品說明:
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
在酸性環境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與4-氨基安替和鐵*化鉀反應生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、?粗酶液提取:
稱取約0.1g組織,加提取液1mL充分研磨,4℃、10000rpm離心10min,取上清液待測。血液可直接用于測定,如果濃度高的話,用提取液稀釋。
二、?測定操作:
1.分光光度計預熱30 min以上,調節波長到510 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑一置于37℃水浴中預熱30 min以上。
試劑名稱(μL)
測定管
對照管
空白管
標準管
蒸餾水
-
-
20
-
1μmol/mL標準品
-
-
-
20
上清液
20
-
-
-
試劑一
40
40
40
40
試劑二
40
40
40
40
混勻后置于37℃水浴中保溫15min
試劑三
120
120
120
120
上清液
-
20
-
-
混勻后于510 nm測定吸光度,分別記為A測定管、A對照管、A空白管、A標準管。
?
三、ACP活性計算:?
1.按蛋白濃度計算
活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產生1 μmol酚。
ACP(U/mg pr)= [C標準品×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)×V樣]÷(Cpr×V樣)÷T
????????????=0.033×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管) ÷Cpr
2.按樣本鮮重計算
活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘催化產生1 μmol酚。
ACP活力(U/g)= [C標準品×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)×V樣] ÷(W÷V提取×V樣)÷T
?????????????=0.033×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷W
3.血液中ACP活性計算
活性單位定義:37℃中每毫升血液每分鐘催化產生1μmol酚。
ACP活力(U)= [C標準品×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)×V樣] ÷V樣÷T
????????????=0.033×(A測定管-A對照管)÷(A
