產品說明
膽固醇是一種類脂，也稱膽甾醇，主要存在于細胞膜中，并經血液來運輸。膽固醇用于生成細胞膜與激素，在細胞信號傳導過程中也起著重要的作用。過高的膽固醇含量(高膽醇血癥)與心血管疾病(如動脈粥樣硬化等)有關；而過低的膽固醇含量(低膽醇血癥)則可能與抑郁癥，癌癥與腦出血有關。
簡單、直接、自動化的膽固醇含量檢測手段是最為理想的。本公司所生產的膽固醇測試盒僅使用單一工作試劑，將膽甾醇酯水解、氧化及顯色反應結合為一個步驟。反應產物的吸光強度(570nm)?或熒光強度(lem/ex?=?585/530nm）與樣本中的總膽固醇濃度成正比。
產品特點
靈敏、準確：比色法1到100?mg/dL膽固醇；熒光法0.2到10?mg/dL膽固醇。
操作簡便：室溫下進行檢測，無需37?°C加熱器。
高通量：?通過96孔板上的高通量檢測手段，每天可以測試上千份樣本。
適用范圍
可直接檢測血清、血漿與其它生物樣本中的膽固醇含量，也可用于檢測藥物對膽固醇代謝的影響。
試劑盒組成(96孔板供100份測試)
緩沖液：20?mL???????酶試劑：120?μL
顯色劑:?120?μL???????標準品：1?mL?300?mg/dL?膽固醇溶液
儲藏條件：試劑在-20°C條件下保存。保質期6個月。
注意事項：本產品僅供研究用。使用過程中應嚴格遵循實驗安全措施。
比色法檢測步驟
在檢測前應將所有試劑置于室溫。血清與血漿樣品應當透明，無渾濁和沉淀；若有沉淀則需過濾或離心除去。樣品在-20?至-80?°C?可存放一年以上。
1.?標準曲線：先將8?μL?300?mg/dL的標準品與232?μL緩沖液混合，配成10倍濃度為100?mg/dL的標準品。按下表比例用緩沖液進一步稀釋標準品，將稀釋的標準品各取50μL加入透明96孔板。
編號 | 標準品?+?緩沖液 | 容量 | 10倍濃度mg/dL |
1 | 100μL???+????0μL | 100μL | 100? |
2 | 60μL????+???40μL | 100μL | ??60? |
3 | 30μL????+???70μL | 100μL | ??30 |
4 | ????0μL????+???100μL | 100μL | ????0 |
樣品：先將樣品稀釋10倍（例如將10?μL樣品與90?μL緩沖液混合）。取50μL稀釋后的樣品溶液加入96孔板。
2.?按照每孔需緩沖液55?μL、酶試劑1?μL、染色劑1?μL的比例，為所有反應孔配制足量工作試劑，并在每個標準品與樣品孔中加入50?μL工作試劑，輕拍使其混合。
3.?室溫下培養30分鐘，在570nm波長下讀取OD值。
備注：若樣品的OD值比100?mg/dL標準品的OD值高，需用緩沖液將樣品再稀釋并重復檢測，所得結果需乘稀釋系數。
熒光法檢測步驟
1.?使用熒光測定法時，線性測量范圍為0.2?到10?mg/dL?膽固醇。將比色檢測過程中制備的標準品再用緩沖液稀釋10倍成為0,?3,?6,?10?mg/dL膽固醇。
2.??取黑色96孔板，將50?μL標準品與50?μL樣品加入不同孔。
3.??每孔加入50?μL工作試劑(見比色法)，輕拍孔板使其混合。
4.?在室溫下反應30分鐘，在lem?=?585nm，lex?=?530nm的條件下讀取熒光值。
5.?如在384孔板中檢測，則使用5?μL標準品/樣品與45?μL工作試劑。
濃度計算
用標準品的值R標準品?減去空白對照值R空白(緩沖液，4號)，對標準品濃度作圖得出斜率。樣品的膽固醇濃度計算如下,
備注：由于標準品與樣品溶液都已稀釋10倍，故此處無需再乘稀釋因子。
實驗必需品(未提供)：多管移液管、96孔板，微孔板分析儀。
Cholesterol?Standard?Curves |
