華美瑞康國際生物技術研究院有限公司
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RACE 一.服務流程 1. 總RNA提取與質檢 2. 已知序列的驗證 3. 合成5'和3' RACE-ready cDNA第一鏈;通過LD-PCR分別進行5' 和3' RACE 4. 基因未知序列驗證 二.樣本要求 需提供新鮮或者保存完好的細胞(至少5×106)、組織(100mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好)或反轉錄好的cDNA不少于30μl(反轉錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間);至少200bp的已知cDNA序列。 三.試驗周期 6~8周內完成。如遇總RNA難以抽提的材料或基因表達量較低的樣品會與客戶協商約定樣品試驗時間。 四.結果提交 試驗完成后公司應向客戶提交如下試驗結果數據: 1. 試驗中用到的所有重要設備的制造廠商、型號、操作參數,以及所有重要試劑的供應商等; 2. 所有試驗操作的步驟一份; 3. 各部分的試驗結果數據,包括: RACE試驗的凝膠圖片和測序報告(測序彩色波形圖、序列堿基圖); 含未知末端片段的質粒及甘油菌。 注意: 由于不同基因在不同組織中存在時空特異性表達,其基因全長序列也不會完全相同。公司提供的試驗結果僅對客戶提供樣本負責,并提供試驗圖片佐證測序結果。此外,由于不同基因mRNA可能存在單核苷酸多態性位點或不同的剪接形式,針對這些類型產物的測序結果準確性由客戶自行判斷。
