產品簡介

MycAwayTM Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 是利用 Yeasen 獨特的等溫擴增技術開發的針對細胞培養液中支原體污染的快速檢測產品，較以往支原體檢測產品本試劑盒做了升級改善，在極大程度上降低了假陽性率，提高檢測的準確度并增強了陰性和陽性的辨識度。在擴增結束后，可在室溫放置一段時間且不會出現由陰性轉變為陽性的現象，不影響陰、陽性判斷。

主要原理是若細胞培養物被支原體污染，支原體 DNA 的保守序列會被大量、快速地擴增，使反應液由藍紫色變成天藍色，結果肉眼可辨，無需電泳。

翌圣 MycAwayTM Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 可以檢測多種支原體，包括細胞培養過程中常見的 8 種支原體。傳統巢式 PCR 支原體法檢測法易受細胞培養上清中抑制物的影響，產生假陰性結果；反應后需開蓋電泳檢測，增加污染導致的假陽性風險。一步法支原體檢測試劑盒完全沒有上述缺點，且其檢測靈敏度、準確性遠遠高于 PCR 法。

MycAwayTM Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 是利用 Yeasen 獨特的等溫擴增技術開發的針對細胞培養液中支原體污染的快速檢測產品，較以往支原體檢測產品本試劑盒做了升級改善，在極大程度上降低了假陽性率，提高檢測的準確度并增強了陰性和陽性的辨識度。在擴增結束后，可在室溫放置一段時間且不會出現由陰性轉變為陽性的現象，不影響陰、陽性判斷。

主要原理是若細胞培養物被支原體污染，支原體 DNA 的保守序列會被大量、快速地擴增，使反應液由藍紫色變成天藍色，結果肉眼可辨，無需電泳。

翌圣 MycAwayTM Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 可以檢測多種支原體，包括細胞培養過程中常見的 8 種支原體。傳統巢式 PCR 支原體法檢測法易受細胞培養上清中抑制物的影響，產生假陰性結果；反應后需開蓋電泳檢測，增加污染導致的假陽性風險。一步法支原體檢測試劑盒完全沒有上述缺點，且其檢測靈敏度、準確性遠遠高于 PCR 法。

產品規格

產品組分

運輸與儲存

冰袋運輸。-20 °C 避光保存，保質期 18 個月。若較長時間不用，請注意避光保存。

注意事項

1. 使用本試劑前請仔細閱讀說明書。
2. 整個實驗，應在超凈臺規范操作，包括反應體系的配制、樣本處理及加樣。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4. 本產品僅作科研用途！

使用方法

1. 支原體待檢樣本準備

貼壁細胞：直接吸取上清。建議在細胞傳代或換液 3 天以上，且匯合度達到 90%左右時取樣，此時上清中支原體含量較高， 便于檢出。

懸浮細胞：500 g 離心 5 min 后，吸取上清。建議在細胞傳代或換液 3 天以上時取樣，此時支原體含量較高，便于檢出。

2. 反應體系

將 MycAwayTM -Color 從-20 °C 取出，溶解后顛倒混勻，瞬時離心確保所有液體落到管底。根據待檢測樣品量，配制如下體系（通常實驗需要設置陰性對照和陽性對照）：

3. 加樣

待測樣品：向其余反應管中加入 1 μL 待測培養上清；

陰性對照：第一支反應管中不加入任何樣品，作為陰性對照；

陽性對照：向最后一個反應管中加入 1 μL Positive Control，作為陽性對照。

【注】

1) 如果反應是在水浴鍋中進行，則每管加入 20 μL 礦物油，以防止液體蒸發導致結果的誤差。如果反應是在 PCR 儀中進行，無需加礦物油。                                                                  2）實驗室支原體污染十分常見，鑒于本試劑盒反應靈敏，建議用戶在超凈臺中配制組分并減少反應后開蓋次數，以免出現假陽性結果。

4. 反應條件

加完樣后，先將樣品在 30 ℃放置 5 min，再在水浴鍋或 PCR 儀中，恒溫 63 °C 孵育 60 min。

【注】：本試劑盒所用酶對溫度非常敏感，強烈建議使用 PCR 儀操作；如用水浴鍋，應先加熱使其達到規定溫度后再反應。溫差超過 2 °C，將導致擴增效率降低，使陽性反應無法在說明書規定的時間內達到典型的天藍色。

5. 結果判斷

63 °C 反應 60 min 后，立刻取出反應管，放于室溫。在光線良好的環境中觀察反應結果（建議以白紙為背景）。如果反應液仍為藍紫色，則判定為陰性；若反應液為天藍色，則判定為陽性。

【注】：在 63 °C 反應的時間必須準確計時，超過說明書規定的反應時間可能會出現假陽性。反應管不可開蓋，否則會出現氣空氣中支原體污染反應，出現假陽性的現象。