封閉用驢血清(原液)（稀釋10-20倍使用）
產(chǎn)品名稱： 封閉用驢血清(原液)（稀釋10-20倍使用）
英文名稱： normal donkey serum/Normal Donkey Serum
產(chǎn)品編號： SL4-10
產(chǎn)品價格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 北京/solarbio
品牌商標(biāo)： Solarbio
更新時間： null
使用范圍： null
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封閉血清說明書
Blocking?Serum
規(guī)格：10ml
保存：-20℃保存，有效期5年。
產(chǎn)品簡介:???
封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實驗中樣本的封閉。可以封閉待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點，另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的Fc片段結(jié)合位點，阻斷抗體與樣品中的Fc受體結(jié)合，從而降低背景，減少假陽性。在選擇封閉血清時，要注意封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白，且與一抗來源不同，可用與二抗相同來源的封閉血清。
使用方法：
使用時，用PBS（0.01mol/L pH7.2-7.4）將正常血清稀釋10-20倍，直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上，37℃度10-30分鐘，清除血清，勿洗，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過夜。
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Western Blot一般流程：
1、蛋白樣品制備：用于蛋白質(zhì)免疫印跡的樣品為蛋白質(zhì)的溶解液，可以是純化后的蛋白質(zhì)樣品，也可以是組織細(xì)胞裂解液。
2、?白定量：評估電泳上樣量或檢測蛋白含量大小。先總蛋白定量，western后在依據(jù)內(nèi)參定量。
3、電泳：依據(jù)實驗?zāi)康倪x擇電泳類型，根據(jù)被檢目的蛋白的分子量選擇膠的濃度，制膠，電泳。
4、轉(zhuǎn)膜：將聚丙烯酰胺上的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至薄膜上，常用半干轉(zhuǎn)或濕轉(zhuǎn)。
5、封閉：選擇適當(dāng)封閉劑將膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合位點封閉阻斷。
6、一抗孵育：一抗與特異性抗原的結(jié)合。
7、二抗孵育：二抗與抗原上結(jié)合的一抗的再結(jié)合過程。
8、底物顯色：二抗一般為標(biāo)記抗體，根據(jù)二抗上的標(biāo)記物來選擇化學(xué)放光或顯色底物等方法進(jìn)行檢測。
9、圖片分析：標(biāo)定Marker，進(jìn)行分析與掃描 。
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