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肝細胞培養

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產品名稱: 肝細胞培養

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更新時間: 2024-10-31T11:50:38

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?肝細胞培養?



初代組織塊培養:
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取新鮮肝臟,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3?左右的小塊,采用帖壁培養法。

初代消化法培養:?


1.把肝組織切成2~4?立方毫米的小塊,用不含鈣鎂的BSS?液洗兩次。

2.移入1:1?的0.1%胰蛋白酶和0.1%膠原酶(都用無鈣鎂BSS?配置)中,4℃冷消化10~12?小時后,通過250?微米和64?微米尼龍網或不銹鋼紗網濾過。

3.收集細胞、BSS?液洗1~2?次、計數、接種培養。

消化培養肝細胞的另一種方法是灌流法(肝臟灌流需用全肝,以較小動物如小鼠和大鼠為好):?

1.無菌解剖動物,取出肝臟,先用BSS?洗除血污。

2.取5ml?注射器一支,吸取消化液后,把注射器頭輕輕插入肝管中,用線繩結扎牢固,以防消化液漏出,輕輕把消化液注入肝管系統,并不時輕揉壓肝臟,以便消化液進入肝小葉中;消化液在肝內停留20~30?分后,在吸出消化液的同時并輕揉壓肝臟,以使肝細胞脫落和消化液吸出。

3.待吸凈消化液后,注入離心管中,低速離心分離,用RPMI?1640?培養基培養(較其它培養基為好),能獲得較純的肝上皮細胞和獲較好的效果。

傳代培養:?


待細胞生長連接成片后,用BSS?洗一二次,加1:1?的0.025%胰蛋白酶和0.02%?EDTA?混合消化3~5?分鐘,待細胞回縮,便停止消化,棄掉消化液,用BSS洗一二次,注入營養液,吹打,制成細胞懸液,再接種培養。

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威斯騰生物服務項目


分子生物學檢測蛋白質與免疫學動物實驗
實時熒光定量PCR單克隆抗體制備帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP多克隆抗體制備抑郁癥動物模型
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術Western-blot?實驗服務脊髓損傷模型
生化指標檢測蛋白雙向電泳實驗服務腦外損傷模型
雙熒光素酶報告基因檢測原核蛋白表達純化骨神經損傷模型
染色質免疫共沉淀(ChIP真核蛋白表達純化心肌缺血模型
GST?pull?DownITRAQ定量蛋白質組學心力衰竭模型
SLAC蛋白組學肺動脈高血壓動物模型
高血壓模型
病毒包裝實驗課題整體外包粥樣動脈硬化模型
過表達/干擾慢病毒包裝純化整體課題外包大腦中動脈阻塞模型
過表達/干擾腺病毒包裝純化細胞整體實驗外包慢性之氣管炎模型
逆轉錄病毒包裝純化動物整體實驗外包過敏性哮喘模型
腺相關病毒包裝純化肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片原代細胞培養肝纖維化模型
細胞因子芯片骨髓間充質干細胞培養膽結石模型
BioPlex懸浮芯片脂肪干細胞培養急性胰腺炎模型
生長因子芯片心肌成纖維細胞培養急性腎衰竭模型
炎癥因子芯片軟骨細胞培養體內血栓模型
血管生成因子芯片血管內皮細胞培養關節炎模型
凋亡因子芯片神經元細胞培養I型和II型糖尿病模型
趨化因子芯片內皮組細胞原代培養裸鼠成瘤
HuProt?TM?20K人類蛋白組芯片基因編輯動物
電生理相關服務動物整體實驗服務
膜片鉗實驗
細胞生物學檢測高通量測序代謝組學
細胞原代培養mRNA測序氣相色譜GC/MS
MTT檢測LncRNA測序液相色譜LC/MS
細胞凋亡檢測全基因組測序核磁共震NMR
細胞周期檢測RNA-Seq測序
細胞克隆形成實驗外顯子測序影像學相關實驗
Transwell細胞遷移/侵襲16s擴增子測序Micro-CT
流式分選Small?RNA測序小動物活體成像
CCK8/XTT檢測宏基因組測序核磁共振
臺盼藍檢測細胞活性單細胞測序PET-CT
藥物篩選細胞學實驗circleRNA測序
細胞粘附性檢測甲基化測序基因編輯動物
細胞劃痕實驗條件性敲除小鼠/大鼠
細胞生物學整體實驗全基因敲除小鼠/大鼠
細胞成管實驗
病理檢測CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入基因芯片
掃描電鏡基因定點突變細胞系LncRNA芯片
透射電鏡單基因敲除細胞系miRNA芯片
HE染色多基因敲除細胞系mRNA芯片
免疫組化目的基因敲入細胞系甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
Tunel(原位末端凋亡法)檢測報告基因敲入細胞系SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除細胞系
免疫熒光
Masson染色CRISPR/Cas9動物敲除/敲入科研設計指導&文章評估/潤色
原位雜交基因敲除大鼠/小鼠科研文獻論著翻譯
熒光原位雜交基因敲入大鼠/小鼠論文翻譯潤色服務
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)臨床實驗/科研實驗設計方案指導
行為學檢測藥物篩選服務項目藥效學評價
曠場實驗高通量自動藥物篩選平臺抗腫瘤藥物藥效學評價
重復性刻板行為檢測細胞高內涵藥物篩選平臺心血管系統藥物藥效學評價
動物跑臺檢測蛋白質組學靶標研發平臺泌尿系統藥物藥效學評價
強迫游泳分子藥理研究平臺內分泌系統藥物藥效學評價
生物膜片鉗藥物篩選平臺抗炎免疫藥物藥效學評價
常規藥物體外篩選

【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!?
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