【評價原理】

孕婦用化妝品的潛在安全性區別于常規化妝品主要體現在對化妝品的生殖毒性方面，例如造成卵巢發育的影響，對胎兒的影響等。利用斑馬魚技術可以對孕婦用化妝品進行安全性評價，主要參照GBT 35517-2017評價方法。

【實驗方法】

隨機選取3 mpf野生型AB品系斑馬魚雌魚于2 L繁殖盒中，分別水溶給予不同濃度的受試物，每個濃度2缸，每缸5尾，同時設置正常對照組（暴露于養魚水中），在28℃室溫培養，培養21天。用Elisa方法測定卵黃蛋白原含量（VTG是卵黃蛋白的前體，卵黃蛋白是胚胎和幼體早期發育主要的營養來源。通過測定斑馬魚卵黃蛋白原含量，可以評價樣品的生殖毒性）；各實驗組雌魚分別于正常繁殖的雄魚進行交配繁殖，觀察各實驗組雌魚的產卵數量，與正常對照組雌魚比較；隨機挑選30枚各實驗組斑馬魚雌魚產下的F1代胚胎（6hpf），于正常條件下培養至5dpf，各實驗組F1代胚胎的毒性反應和致畸性數量與正常對照組進行比較；測量并統計卵巢重量，制作卵巢組織切片。上述指標反映孕婦用化妝品的安全性。（周期：45天 供試品用量：約500g ）

【評價指標】

1、VTG卵黃蛋白原含量

2、雌魚生殖力（產卵數）、子一代發育毒性

3、卵巢重量、卵巢組織切片

【結果表示】

1、VTG卵黃蛋白原含量（柱狀圖）

圖1. VTG卵黃蛋白原含量

2、生殖力（產卵數柱狀圖 略）、發育毒性

圖2. 發育毒性表型圖

（供試品組與實驗對照組相比，出現卵黃囊吸收延遲、肝變性、腸腔異常、心包水腫，提示供試品有發育毒性）

H=Heart；L=Liver；Y=Yolk sac；In=Intestinal tract；J=Jaw；B=Brain；M=Muscle；E=Eye；SB=Swimming bladder

3、卵巢重量（柱狀圖）、卵巢組織切片

【評價結論】

1、與正常對照組相比， 卵黃蛋白原（VTG）含量減少，雌魚產卵數減少，子一代表現出發育毒性，卵巢質量下降，成熟卵細胞比例均降低，提示在本實驗條件下，供試品具有生殖毒性的風險。

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