利用斑馬魚評價孕婦用化妝品的安全性
產品名稱： 利用斑馬魚評價孕婦用化妝品的安全性
英文名稱： zebrafish experiments
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更新時間： 2024-06-04T15:23:07
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【評價原理】
孕婦用化妝品的潛在安全性區(qū)別于常規(guī)化妝品主要體現在對化妝品的生殖毒性方面，例如造成卵巢發(fā)育的影響，對胎兒的影響等。利用斑馬魚技術可以對孕婦用化妝品進行安全性評價，主要參照GBT 35517-2017評價方法。
【實驗方法】
隨機選取3 mpf野生型AB品系斑馬魚雌魚于2 L繁殖盒中，分別水溶給予不同濃度的受試物，每個濃度2缸，每缸5尾，同時設置正常對照組（暴露于養(yǎng)魚水中），在28℃室溫培養(yǎng)，培養(yǎng)21天。用Elisa方法測定卵黃蛋白原含量（VTG是卵黃蛋白的前體，卵黃蛋白是胚胎和幼體早期發(fā)育主要的營養(yǎng)來源。通過測定斑馬魚卵黃蛋白原含量，可以評價樣品的生殖毒性）；各實驗組雌魚分別于正常繁殖的雄魚進行交配繁殖，觀察各實驗組雌魚的產卵數量，與正常對照組雌魚比較；隨機挑選30枚各實驗組斑馬魚雌魚產下的F1代胚胎（6hpf），于正常條件下培養(yǎng)至5dpf，各實驗組F1代胚胎的毒性反應和致畸性數量與正常對照組進行比較；測量并統計卵巢重量，制作卵巢組織切片。上述指標反映孕婦用化妝品的安全性。（周期：45天 供試品用量：約500g ）
【評價指標】
1、VTG卵黃蛋白原含量
2、雌魚生殖力（產卵數）、子一代發(fā)育毒性
3、卵巢重量、卵巢組織切片
【結果表示】
1、VTG卵黃蛋白原含量（柱狀圖）
圖1. VTG卵黃蛋白原含量
2、生殖力（產卵數柱狀圖 略）、發(fā)育毒性
圖2. 發(fā)育毒性表型圖
（供試品組與實驗對照組相比，出現卵黃囊吸收延遲、肝變性、腸腔異常、心包水腫，提示供試品有發(fā)育毒性）
H=Heart；L=Liver；Y=Yolk sac；In=Intestinal tract；J=Jaw；B=Brain；M=Muscle；E=Eye；SB=Swimming bladder
3、卵巢重量（柱狀圖）、卵巢組織切片
【評價結論】
1、與正常對照組相比， 卵黃蛋白原（VTG）含量減少，雌魚產卵數減少，子一代表現出發(fā)育毒性，卵巢質量下降，成熟卵細胞比例均降低，提示在本實驗條件下，供試品具有生殖毒性的風險。
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