小鼠β-肌動(dòng)蛋白(β-Actin)ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱： 小鼠β-肌動(dòng)蛋白(β-Actin)ELISA試劑盒
英文名稱： Mouse β-Actin ELISA Kit
產(chǎn)品編號(hào)：
產(chǎn)品價(jià)格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國(guó)
品牌商標(biāo)： 進(jìn)口
更新時(shí)間： null
使用范圍： null
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小鼠β-肌動(dòng)蛋白(β-Actin)ELISA試劑盒
小鼠β-肌動(dòng)蛋白（β-Actin）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）
使用說(shuō)明書
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【試劑盒名稱】
小鼠β-肌動(dòng)蛋白（β-Actin）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）
【試劑盒用途】
定量檢測(cè)小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中β-肌動(dòng)蛋白（β-Actin）的含量。
【檢測(cè)原理】
本試劑盒采用雙抗體一步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和酶標(biāo)工作液加入到預(yù)先包被人血漿α顆粒膜蛋白（GMP-140）抗體的透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入顯色劑A、B液，顯色劑（TMB）在辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中人血漿α顆粒膜蛋白（GMP-140）濃度呈正相關(guān)，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中人血漿α顆粒膜蛋白（GMP-140）含量。
【試劑盒組成】
|
1 |
酶標(biāo)包被板 |
12孔×8條 |
7 |
顯色劑A液 |
6mL |
|
2 |
標(biāo)準(zhǔn)品：240nmol/l |
0.6mL |
8 |
顯色劑B液 |
6mL |
|
3 |
20倍濃縮洗滌液 |
25mL |
9 |
終止液 |
6mL |
|
4 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
6mL |
10 |
說(shuō)明書 |
1份 |
|
5 |
樣本稀釋液 |
6mL |
11 |
封板膜 |
2張 |
|
6 |
酶標(biāo)試劑 |
10mL |
12 |
密封袋 |
1個(gè) |
備注：標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為：240、120、60、30、1.5、7.5 nmol/l
【需要而未提供的試劑和器材】
1、
2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
3、精密移液器及一次性吸頭
4、蒸餾水
5、一次性試管
6、吸水紙
【操作步驟】
1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；每孔再加入酶標(biāo)工作液100μL；空白對(duì)照孔不加。
4、溫育：
5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書操作洗板）。
6、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，
7、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
8、測(cè)定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值（OD值）。
9、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。最終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
【樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)?/SPAN>疊氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。
2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于
3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。
【注意事項(xiàng)】
1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
4、若顯色過(guò)淺，可