本試劑盒利用抗原抗體特異性結合原理開展雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA），即通過向預先包被有活性氧簇（ROS）抗體的微孔中，依次加入待測標本、標準品等試劑和辣根過氧化物酶（Horseradish peroxidase, HRP）標記的檢測抗體，經過孵育和洗滌后，用底物TMB顯色。TMB在HRP的催化下會變成藍色，并在酸的作用下最終變成黃色。孵育完成后，用酶標儀在450nm波長下測定溶液吸光度值（OD值），結合標準曲線計算樣品濃度。液體顏色的深淺和樣品中的目的蛋白或分子含量呈正相關。

靈敏度：1.0 ng/mL

特異性：本試劑盒僅識別馬鈴薯組織標本中的ROS，與其他類似蛋白或分子無明顯交叉反應。

注意事項

1. 本試劑盒僅用于馬鈴薯內源性ROS蛋白濃度測定，不可用于其他物種ROS含量檢測。

2. 所有試劑在使用前應平衡至室溫（20-25 ℃），使用完后立即置于2-8 ℃保存。

3. 請按照推薦的溫度和時間孵育微孔板，孵育時避免強光直接照射。

4. 操作要認真仔細，確保加入試劑體積和質量的準確性。

5. 建議將待測樣品用樣本稀釋液按一定比例（至少2倍）稀釋后再加入酶標板，以減少基質效應對檢測結果的影響。在計算樣品濃度時，乘以對應稀釋比例，即得樣品原始濃度。

6. 洗板動作要輕柔，盡量沿孔壁加入液體，切記強力沖洗板底；同時注意吸盡殘存液體。

7. 孵育過程中注意防止微孔板液體蒸發，導致“干板”。

8. 在使用酶標儀測量前，注意徹底清除板底殘留液體、污漬和指紋，以免影響實驗結果。

9. 底物顯色液應為無色或淺色，變藍后不可用于實驗檢測。

10. 有序存放試劑和標本，避免交叉污染。

11. 不能使用過期或變質產品，不同貨號和批次產品不得混合使用。

12. 實驗剩余的板條應立即放回自封袋中，密封后低溫干燥保存。

13. 在使用本試劑盒時，請注意做好個人防護。

14. 完成檢測后，請按照廢棄試劑處理要求處置相關樣品、試劑及耗材。

樣品收集及保存方法

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行。

3.  植物萃取液或其它相關樣本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測。

4.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。