啟動子報告克隆-克隆與表達-試劑-生物在線
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啟動子報告克隆

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產品名稱: 啟動子報告克隆

英文名稱: 啟動子報告克隆

產品編號: 啟動子報告克隆

產品價格: 請詢價

產品產地: genecopoeia

品牌商標: genecopoeia

更新時間: 2024-10-09T10:01:25

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GLuc-ON™ 啟動子報告克隆

GLuc-ON™ 啟動子報告克隆在GLuc報告基因上游插入一段1.2~1.5 kb的序列,這段插入序列與基因轉錄起始位點(TSS)上游大約1.5kb到下游200bp之間的5’側翼序列一致,可以通過觀察熒光素酶的活性來研究啟動子對基因的調節作用。

GeneCopoeia可提供預制和定制的GLuc-ON™ 啟動子克隆,包括單報告基因載體系統和雙報告基因載體系統。單報告基因載體系統以Gluc、mCherry或GFP作為啟動子的報告基因;雙報告基因載體系統以Gluc作為啟動子報告基因,以分泌型堿性磷酸酶 (SEAP)作為信號標準化的內參,可在活細胞中對超過20,000種人和18,000種小鼠啟動子進行實時活性分析。

Promoter reporter clones mechanism of action

圖1. GLuc-ON™ 啟動子報告克隆的雙報告基因檢測原理圖。

優勢

活細胞分析

  • 分泌型Gluc報告子
  • 無需裂解細胞
  • 節省樣本,減少突變,簡化試驗流程(如脈沖追蹤分析等)

實時研究

  • 可獲得即時檢測數據
  • 與實時活性分析過程類似

分泌型雙報告系統

  • 分泌型Gluc和分泌型堿性磷酸酶
  • 對多樣本常規轉染進行精確比較

高通量兼容

  • 可用于信號通路研究
  • 可進行高通量研究

高靈敏度

  • GLuc比螢火蟲或Renilla熒光素酶靈敏度高1000倍

使用方便

  • 所有啟動子報告克隆均可直接用于細胞轉染

Gaussia 熒光素酶

GLuc-ON™ 啟動子克隆采用經過修飾的GLuc(mGLuc)作為報告基因,能產生強烈且穩定的熒光信號,克服了人野生型GLuc(wtGLuc)信號衰退快的缺點。

Signal stability of mGluc and wtGlucSignal stability of mGluc and wtGluc

圖2. mGLuc (藍色) 和 wtGLuc (紅色)的信號穩定性比較。左側:含有穩定劑的緩沖液;右側:常規緩沖液。

雙報告系統

GLuc-ON™ 啟動子克隆可以將分泌型堿性磷酸酶(SEAP)作為第二個報告子和內參。這種雙報告系統可以對多樣本常規轉染進行精確比較。

  圖3. 不同啟動子在H1B1B和HEK293T細胞中的活性分析。雙報告系統啟動子克隆和對照以兩個重復轉染進兩種細胞中。轉染24小時((HEK293T)和48小時(H1B1B)后分析樣品。NEG(包含非啟動子序列)和EMPTY(載體不含啟動子)作為陰性對照。