心血管領域
產品名稱: 心血管領域
英文名稱: Cardiovascular field
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心血管疾病是當今威脅人類最嚴重的疾病之一。使用工具病毒對心血管疾病特定基因進行定向和組織特異性的改造,將為心血管研究提供強大工具。
心血管系統研究如何挑選合適的工具病毒
慢病毒、腺病毒和腺相關病毒(AAV)等都是常用的工具病毒載體,在心血管系統的研究中該如何選擇呢?
1.? 慢病毒:慢病毒的優點是可以將靶基因整合入宿主的基因組中持續穩定的表達,引起的免疫反應較為溫和。但是其缺點是在體注射時,對心血管系統的細胞(特別是心肌細胞)缺乏特異性的趨向性,實驗者往往需要通過心肌注射的方法來實現心肌細胞的轉染,而開胸實驗的難度較大,易導致動物死亡,因此影響其廣泛應用。
2.? 腺病毒:許多心血管疾病的研究會使用腺病毒載體進行,因為腺病毒對心肌細胞的感染效果較好,并且靶基因的表達效果較好。但其表達是瞬時的(一般在心肌細胞中可持續1-4周),且易引起較強烈的免疫反應,嚴重時可導致實驗動物死亡。
3.? 腺相關病毒AAV:與腺病毒相比,AAV對心肌細胞具有更高的感染效率。運用AAV載體的另一個顯著優點是有些AAV血清型,如AAV1、AAV6、AAV8和AAV9等對于心肌細胞具有較高的趨向性,可直接靜脈注射感染,不需要復雜危險的開胸手術,因此現有的Ⅱ期臨床試驗,均使用AAV
了解了這些病毒載體在心血管系統應用中的優勢和不足后,如何根據具體的實驗需求和基因情況選擇合適的病毒載體呢?我們需要考慮這幾個方面:
1.? 工具載體的表達時間與實驗觀察時間是否相符;
2.? 工具載體可以容納的片段大小與目的基因大小是否契合;
3.? 工具載體對目的細胞、在體組織的轉導是否足夠高效。
下表總結了常用基因操作工具的選擇方法:

吉凱小建議:
1.? 在體實驗建議選擇腺相關病毒,它具有滴度高,擴散效果好,免疫原性低等特點。且AAV 1/6/8/9等血清型對心臟均具有較好的親和性,可直接尾靜脈注射感染心臟,不需要復雜危險的開胸手術。點擊了解更多AAV血清型選擇小竅門>>

2.? 心肌細胞體外感染建議選擇慢病毒或腺病毒:慢病毒在感染原代心肌細胞后2-4 天開始表達,且對心肌細胞的毒性低、損傷??;腺病毒在感染原代心肌細胞后1-2天開始表達,感染效率高,表達快。
3.? 如需目的基因在心肌或平滑肌細胞中特異性表達,可使用特異性啟動子,如心肌細胞特異性啟動子cTnT、心肌細胞早期特異性啟動子mNkx2.5及平滑肌細胞特異性啟動子SM22a。吉凱提供組織特異性啟動子載體的病毒包裝服務,點擊了解>>
用量參考
心血管系統病毒用量參考
以下表格中為吉凱客戶應用文獻總結(部分)。更多心血管系統病毒注射參數,點擊查看與下載>>
1. 慢病毒

代表文獻(23)Circulation,2016:CIRCULATIONAHA.116.017949.

2. 腺病毒

代表文獻(24)吉凱客戶文章Cardiovascular research,2014:cvu007.



