人抗X因子酶聯免疫分析（ELISA）

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：???????????????????????????????????????????????????????? ?96T

0.1 U/ml -4 U/ml

?

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中抗X因子活性。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗X因子水平。用純化的人X因子抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入抗X因子，再與HRP標記的X因子抗原結合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗X因子呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人抗X因子濃度。

試劑盒組成

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1.???????? 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

?

?

2.???????? 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.???????? 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。??

4.???????? 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.???????? 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.???????? 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.???????? 溫育：操作同3。

8.???????? 洗滌：操作同5。

9.???????? 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μlTUNEology 波長可調檢測卡盒-->