本試劑盒利用抗原抗體特異性結合原理開展雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA），即通過向預先包被有白細胞介素27（IL-27）抗體的微孔中，依次加入待測標本、標準品等試劑和辣根過氧化物酶（Horseradish peroxidase, HRP）標記的檢測抗體，經過孵育和洗滌后，用底物TMB顯色。TMB在HRP的催化下會變成藍色，并在酸的作用下最終變成黃色。孵育完成后，用酶標儀在450nm波長下測定溶液吸光度值（OD值），結合標準曲線計算樣品濃度。液體顏色的深淺和樣品中的目的蛋白或分子含量呈正相關。

靈敏度：1.0 pg/mL

特異性：本試劑盒僅識別人組織標本中的IL-27，與其他類似蛋白或分子無明顯交叉反應。

樣品收集及保存方法

1. 血清：使用血清分離管收集全血標本，室溫（約25 ℃）放置2小時或4 ℃冰箱放置過夜， 3000轉離心10分鐘或1000 g離心20分鐘，取上清立即檢測，或將上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但應避免反復凍融。

2. 血漿：用EDTA或肝素抗凝管采集血液標本，在4 ℃條件下3000轉離心20分鐘或1000 g離心15分鐘，取上清立即檢測，或將上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但應避免反復凍融。

3. 組織勻漿：使用預冷的PBS（pH=7.0-7.4）溶液洗滌組織，盡量洗去殘存血液（裂解的紅細胞會影響測量結果準確性），稱重后將組織剪碎，按1:9的質量體積比（即1 g組織加入9 mL溶液）加入PBS溶液（建議加入適量蛋白酶抑制劑），采用玻璃勻漿器充分研磨。后將勻漿液轉入離心管中，5000 g離心10分鐘，取上清立即檢測，或將上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但應避免反復凍融。

4. 細胞培養上清：吸取細胞培養液，1000 g離心20分鐘，取上清立即檢測，或將上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存，但應避免反復凍融。

5. 其他標本：視具體情況確定，腹腔積液、胸腔積液和關節積液等的收集和存儲方法同細胞培養上清。

6. 樣品外觀：樣品在液態時應澄清透明，處理時應盡量通過離心去除懸浮物和漂浮物。

7. 樣品保存：樣本收集后如在一周內檢測，可置于4 ℃保存；若不能及時檢測，請按一次使用量進行小份分裝，置于-20 ℃（1個月內檢測）或-80 ℃（半年內檢測）保存，避免反復凍融。