ELISA無背景封閉及抗體稀釋液
產品名稱： ELISA無背景封閉及抗體稀釋液
英文名稱：
產品編號： H04
產品價格： 0
產品產地： shanghai china
品牌商標： willget
更新時間： 2023-09-20T14:20:30
使用范圍： null
上海文淵閣生物科技有限公司
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ELISA無背景封閉及抗體稀釋液
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????? 文淵閣開發的ELISA無背景封閉及抗體稀釋液，是傳統BSA或奶粉封閉液的替代品，室溫放置不會變質，只需5分鐘室溫封閉，即可實現無背景。此封閉液使得傳統ELISA洗板流程得以簡化，不必使用TWEEN20等表面活性劑，直接用去離子水漂洗即可。
????? 附送的TMB顯色液是目前HRP顯色底物中最安全和最靈敏的顯色底物，一般的市售類似產品需要兩管用前混合，文淵閣開發了一管式即用型TMB顯色底物，并使其靈敏度相比傳統產品進一步提高，無背景封閉液聯合一管式TMB，可省去傳統的硫酸酸化終止反應，在底物反應15-20分鐘后，直接在OD595波長下進行讀數。
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試劑包裝及儲存：
ELISA無背景封閉及抗體稀釋液 ??????100ml
一管式TMB顯色底物（附送） ????????20ml??????????
室溫運輸，? 4℃保存一年
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操作步驟：
1，????? ?將抗原用PBS稀釋至5ug/ml, 在elisa板的每孔中加入200ul，室溫放置2h,或4℃過夜，甩掉孔中包被抗原
2，????? ?用去離子水將elisa孔注滿后甩掉去離子水，
3，????? ?重復步驟2,2次
4，????? ?在EP管中加入90ul無背景封閉及抗體保存液，加入10ul一抗，用移液槍混勻。
5，????? ?在elisa板中每孔加入200ul無背景封閉液，室溫封閉5分鐘。
6，????? ?取ep管中的一抗100ul加入elisa板的第一孔
7，????? ?用移液槍（100ul）反復洗吹第一孔中的液體20次進行混勻
8，????? ?混勻后吸取第一孔液體100ul轉移至第二孔中，如同步驟7一樣進行混勻，混勻后吸100ul轉移至第三孔，如此便形成了一抗從1:30的第一孔至之后孔的3倍倍比稀釋，另外棄去最后一孔100ul
9，????? 將elisa板轉移至37℃，孵育2h
10，???? 甩掉elisa板一抗，用去離子水將每孔注滿后，甩掉殘余水，如此反復洗6次
11，???? 將二抗按1:200到1:1000,稀釋于無背景封閉及抗體稀釋液，混勻,每孔加入180ul
12，???? 將elisa板轉移至37℃，孵育1h
13，???? 重復步驟10，進行洗板
14，???? 每孔加入200ul一管式TMB顯色底物，將elisa板轉移至37℃，孵育15min-20min
15，???? 不必按傳統方法進行硫酸酸化，可直接在OD595波長下進行讀數。
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???? （不加一抗只加二抗的孔可作為陰性對照，陰性對照值的2倍可作為cutoff值，高于此值的稀釋倍數即為elisa效價）