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SuperScript? III 反轉錄酶?(RT) (SuperScript? III Reverse Transcriptase (RT))?是?SuperScript? II RT?的專有突變體，在?50°C?具有活性，半衰期為?220?分鐘，使用基因特異性引物?(GSP)?提高特異性，在所有?RT?中?cDNA?產量最高。 如果要進行特定基因的?RT-PCR?或從總?RNA?或?poly (A)+ RNA?樣品生成?cDNA，該產品十分理想。 和?SuperScript? II?一樣，它可以從單鏈?RNA、DNA?或?RNA:DNA?雜合體合成互補?DNA鏈。 通過引入點突變對?SuperScript? III RT?進行遺傳改造，這些點突變可以增加半衰期、降低?RNase?活性并增加熱穩定性。 進行結構修飾后：

• 50°C?時半衰期為?220?分鐘，獲得最高的?cDNA?產量（圖?1）

• RNase H?活性降低，獲得更多全長?cDNA

• 在?50°C?有最大活性，用?GSP?增加特異性

• 能增加?RT?單位而不抑制后續的?PCR
  應用：?第一鏈?cDNA?合成、陣列標記、cDNA?文庫、RT-PCR、引物延伸和?3′?和?5′ RACE。
  來源：?純化自表達?M-MLV?的?pol?基因的大腸桿菌?(1,2)，通過突變增加了熱穩定性和半衰期，降低了RNase H?活性。
  性能和質量測試：?SDS-PAGE 純度；脫氧核糖核酸內切酶、脫氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶分析（圖?2）及?cDNA?產物的產量和長度。
  單位定義：?一個單位的?SuperScript? III RT?是在?37°C?的反應體系中，使用?poly(A)?oligo(dT)_12-18作為模板?引物，在?10?分鐘內將?1?納摩爾脫氧核糖核苷酸摻入酸沉淀材料所需的酶量?(3)。
  單位反應條件：?50 mM Tris-HCl (pH 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl 2、1 mM DTT。?0.5?mM [ 3 H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)_12-18、0.1 mg/ml BSA?和酶，共?50 μl，溫度?37°C，時間?10分鐘。

詳細說明

常用規格

內容和儲存

SuperScript? III Reverse Transcriptase is supplied with a vial of 5X first-strand buffer [250 mM Tris-HCl (pH 8.3), 375 mM KCl, 15 mM MgCl₂], and a vial of 100 mM DTT.
Store at -20°C. Guaranteed stable for 6 months when properly stored.

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