游離（FFA）脂肪酸檢測分析方案

一、 項目簡介

1.1 游離脂肪酸概述

游離脂肪酸（FFA）即非酯化脂肪酸，主要來源于脂蛋白和脂肪組織內甘油三酯（TG）的脂解。脂肪細胞內的TG 在各種脂肪酶作用下被水解為FFA和甘油，被機體各組織利用。有研究表明游離脂肪酸與心血管疾病，肝臟疾病，二型糖尿病有密切聯系，正常人體組織對FFA的利用受胰島素和胰高血糖素等激素的調控。

1.2 技術流程

圖1. 游離（總）脂肪酸靶標定量分析流程圖

1.3分析內容

基礎數據分析包括：數據預處理，定量結果統計分析，Bi-plot分析。

1.4檢測平臺

分析檢測平臺：GC-MS

二、檢測分析方案

2.1標準品配置

建立標準物質校準曲線，標準物質清單見表1：

表1. 標準物質列表

2.2數據預處理

對原始數據進行峰解卷積，積分，峰對齊，標準化處理。通過原始總離子流(TIC)色譜圖，初步觀察儀器的保留時間重現性，所測得物質的情況。

圖2. 代表樣品游離脂肪酸GC-MS總離子流色譜圖

2.3 定量結果統計分析

通過標準曲線計算樣品中游離脂肪酸的定量結果，并結合學氏T檢驗統計組間差異表達的化合物。

表3. 游離脂肪酸定量分析結果（部分）

2.4 Bi-Plot分析

對所有數據進行Bi-plot分析能從總體上反應各組樣本之間的總體代謝差異和組內樣本之間的變異度大小，同時可以直觀地觀察樣品和代謝物之間的關系。使用SIMCA軟件(V14.1, Umetrics, Umea, Sweden)對數據進行UV格式化（Unit Variance Scaling）和平均中心化（Mean-Centered）處理，以獲得更加可靠且更加直觀的結果。軟件進行自動化模型擬合分析，獲得最可靠數學模型的主成分數目。例圖如下所示：

圖4. Bi-plot分析（示意圖）

三：時間概算：

代謝流分析實驗檢測：45個工作日

代謝流分析數據分析：10個工作日

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