體液外泌體快速抽提試劑盒
產(chǎn)品名稱： 體液外泌體快速抽提試劑盒
英文名稱： Hieff? Quick exosome isolation kit (for Body Fluids)
產(chǎn)品編號(hào)： 41204ES10
產(chǎn)品價(jià)格： 詢價(jià)
產(chǎn)品產(chǎn)地： 翌圣生物
品牌商標(biāo)： Yeasen
更新時(shí)間： 2025-02-08T11:18:41
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 李自轉(zhuǎn)
- 地址 : 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄一號(hào)樓三層南單元
- 郵編 : 200030
- 所在區(qū)域 : 上海
- 電話 : 139****5640 點(diǎn)擊查看
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- 郵箱 : lizizhuan@yeasen.com
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中；Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息，不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。
本試劑盒采用獨(dú)特的分離技術(shù)，可以快速?gòu)捏w液如腦脊液、羊水、唾液、肺泡灌洗液及鼻腔盥洗液等體液中獲得大量完整的外泌體顆粒，適用于下游的細(xì)胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量（qPCR）和高通量測(cè)序等應(yīng)用。
組分信息
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組分編號(hào) |
組分名稱 |
41204ES10 |
41204ES30 |
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41204-A |
Exosome isolation solution（Body Fluids） |
10 T (5 mL) |
30 T (15 mL) |
儲(chǔ)存條件
室溫運(yùn)輸，本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個(gè)月。
使用說(shuō)明
1.樣品制備：
1）收集新鮮的樣品，置于冰上待用；若為凍存的樣品，可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍，待完全融化后置于冰上待用。
2）取1 mL（單次樣品量不能低于1 mL）體液樣品轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃，3000×g離心10 min，棄沉淀，并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
3）將轉(zhuǎn)移的上清，4 ℃，12,000×g離心10 min，棄沉淀，將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
2.外泌體分離：
1）向預(yù)處理后的樣品中，按照下表加入Exosome isolation solution （其他樣品量根據(jù)表中試劑用量進(jìn)行等比例變換）。
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Body Fluids |
41204-A 試劑用量 |
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2.0 mL |
0.5 mL |
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4.0 mL |
1.0 mL |
2）蓋緊離心管蓋，渦旋振蕩1 min，再放置于2℃至8℃靜置8 h以上（注：增加靜置時(shí)間可提高外泌體得率，但不可超過(guò)24 h）。
3）取出裝有混合液的離心管，4℃，12,000×g離心30 min，棄上清（盡可能吸凈上清液），收集富含外泌體的沉淀。
4）將含有沉淀的離心管再次于4℃，12,000×g離心2 min，棄上清（盡可能吸盡上清液）。
5）吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物，待其充分懸浮于PBS后，將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。
【注】加入PBS的量，建議根據(jù)初始樣本的體積決定，初始樣本體積：1×PBS體積=10:1。
6）將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃，12,000×g離心2 min，棄沉淀，保留上清液，該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
【注】此時(shí)如果依然可以看到明顯的沉淀，建議重復(fù)步驟6，重新進(jìn)行洗滌和沉淀。
7）純化后的外泌體可于4℃保存3天，-80℃長(zhǎng)期保存，建議對(duì)外泌體進(jìn)行分裝后保存，避免反復(fù)凍融。
外泌體濃縮（可選）：
鑒于體液中雜蛋白較多，如果后續(xù)需要進(jìn)行細(xì)胞共培養(yǎng)或者高通量測(cè)序，建議進(jìn)一步純化外泌體。可以使用密理博100kD的孔徑的超濾管于4℃以14,000×g離心10-30 min，內(nèi)管中即為純化后的外泌體顆粒；除此之外，還可以使用抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。
外泌體除菌（可選）：
獲得的外泌體后期需要與細(xì)胞共培養(yǎng)，可以使用0.22 μm的濾器進(jìn)行過(guò)濾除菌。初次嘗試時(shí)，建議外泌體蛋白濃度在10-100 μg/mL內(nèi)做梯度摸索，選擇一個(gè)較為合適的條件。
注意事項(xiàng)
1、使用前請(qǐng)將外泌體抽提試劑（41204-A）充分混勻。
2、產(chǎn)品只針對(duì)體液樣本，不適用其它血清/血液或者是細(xì)胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提；如果需要進(jìn)行細(xì)胞上清外泌體分離，請(qǐng)選用細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。
3、如果想要進(jìn)一步純化外泌體，可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
5、本產(chǎn)品僅作科研用途！
Ver.CN20230920