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腺相關病毒(adeno-associated virus, AAV)

腺相關病毒(adeno-associated virus, AAV)

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產品名稱: 腺相關病毒(adeno-associated virus, AAV)

英文名稱: adeno-associated virus, AAV

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腺相關病毒(adeno-associated virus, AAV)?是簡單的非病原單鏈DNA?,需要輔助病毒如腺病毒、單純皰疹病毒存在的條件下,才能在感染的宿主細胞中復制合成裝配蛋白,產生新的病毒顆粒。野生型AAV感染人宿主細胞后,可定點整合到19號染色體19q13.3qter處,該區域稱AAVS1,可能與ITR和Rep蛋白的作用相關。
與腺病毒相比,腺相關病毒免疫原性較低,有多種血清型,可感染不同組織的細胞。AAV2是目前應用最廣的腺相關病毒,對多數常見細胞均有較好效果。AAV-2是天然缺陷型病毒(生產性感染依賴于幾個額外的反式因子),并且目前還沒有發現它和任何的人類疾病有關聯。在吉滿生物使用的AAV Helper-Free System中,AAV-2?反向重復(ITR)序列和rep/cap基因分別位于缺少共同序列的單獨的質粒上,以阻止生產出重組野生型病毒。
AAV Helper-Free System利用已經明確用于調節AAV復制和表達的腺病毒基因產物,并且這些基因產物能通過轉染引進宿主細胞。在AAV Helper-Free System中,生產具感染性的AAV病毒顆粒所需的腺病毒基因產物(例如:E2A,E4和VA RNA基因)大部分由pHelper質粒提供,其余的腺病毒基因產物由穩定表達腺病毒E1基因的AAV-293宿主細胞提供。本系統包括通過改良HEK293腺相關病毒生產能力而衍生出的AAV-293細胞。通過消除對活的輔助病毒的需求,AAV Helper-Free System提供一個更安全,更純凈和更便利的替代逆轉錄病毒和腺病毒的基因傳遞系統。

腺相關病毒服務類型:
優勢:
  • 宿主細胞范圍廣:腺相關病毒可以感染廣泛的哺乳動物細胞
  • 高滴度:可以生產出≥1012?v.g. /ml的高滴度病毒
  • 重組腺相關病毒能感染分裂期和非分裂期細胞
  • 表達出的人類蛋白質可以正確的折疊和修飾
血清型:

吉滿生物在包裝腺相關病毒時有多種不同的AAV血清型可供客戶選擇,建議客戶針對不同組織器官選擇相應血清型的AAV病毒,見下表。

血清型 組織親和性
AAV1 中樞神經,肌肉,肝臟,腦組織,眼
AAV3 肌肉,肝臟,肺,眼
AAV4 中樞神經,肌肉,眼,腦
AAV5 肺,眼,中樞神經,關節滑膜,胰腺
AAV6 肺,心臟
AAV7 肌肉,肝臟
AAV8 肝臟,眼,中樞神經,肌肉
AAV9 心臟,肌肉,肺(肺泡),肝臟,中樞神經
DJ 視網膜,肝臟,肺,腎臟
DJ/8 大腦組織,其他離體組織


AAV的血清型是指目前已發現的不同衣殼蛋白的數十種AAV在體內產生不同的抗血清類型,它們對相同的組織和細胞具有不同的感染效率。

Cell Line AAV-1 AAV-2 AAV-3 AAV-4 AAV-5 AAV-6 AAV-8 AAV-9 AAV-DJ AAV-DJ/8
Huh-7 13 100 2.5 0.0 0.1 10 0.7 0.0 500 0.2
HEK293 25 100 2.5 0.1 0.1 5 0.7 0.1 500 0.3
HeLa 3 100 2.0 0.1 6.7 1 0.2 0.1 667 0.2
HepG2 3 100 16.7 0.3 1.7 5 0.3 ND 1250 0.5
Hep1A 20 100 0.2 1.0 0.1 1 0.2 0.0 400 0.1
911 17 100 11 0.2 0.1 17 0.1 ND 500 0.0
CHO 100 100 14 1.4 333 50 10 1.0 25000 5.0
COS 33 100 33 3.3 5.0 14 2.0 0.5 500 0.3
MeWo 10 100 20 0.3 6.7 10 1.0 0.2 2857 1.0
NIH3T3 10 100 2.9 2.9 0.3 10 0.3 ND 500 0.1
A549 14 100 20 ND 0.5 10 0.5 0.1 1000 0.1
HT1180 20 100 10 0.1 0.3 33 0.5 0.1 333 0.2
Monocytes 1111 100 ND ND 125 1429 ND ND 100 ND
Immature DC 2500 100 ND ND 222 2857 ND ND 200 ND
Mature DC 2222 100 ND ND 333 3333 ND ND 100 ND

?AAV-2?作為標準,感染效率為?100. ND =未檢測

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