革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒
產(chǎn)品名稱(chēng)： 革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒
英文名稱(chēng)： 革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒
產(chǎn)品編號(hào)： 無(wú)
產(chǎn)品價(jià)格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： solarbio
品牌商標(biāo)： solarbio
更新時(shí)間： 2025-12-26T13:55:27
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 索萊寶-龔思雨
- 地址 : 北京市北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)環(huán)科中路16號(hào)26幢3層301
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- 所在區(qū)域 : 北京
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革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒
產(chǎn)品內(nèi)容：?
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試劑盒組成 |
D1120-50T |
D1120-100T |
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RNaseA |
250ul |
500ul |
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溶菌酶 |
3ml |
5.5ml |
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溶液 |
15ml |
30ml |
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溶液Ⅱ |
15ml |
30ml |
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溶液Ⅲ |
20ml |
40ml |
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漂洗液 |
15ml |
15ml×2 |
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洗脫液 |
15ml |
30ml |
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吸附柱 |
50個(gè) |
100個(gè) |
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收集管 |
50個(gè) |
100個(gè) |
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說(shuō)明書(shū) |
1份 |
1份 |
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? ? ? ? 使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。溶液Ⅰ在使用前先加入 RNaseA（將試劑盒中提供的 RNaseA 全部加入） ，混勻，置于 2-8℃保存。如非指明，所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。
?
?
操作步驟：
1、取 1-5ml ?細(xì)菌培養(yǎng)物，12000rpm離心 1min，盡量吸除上清（菌液較多時(shí)可以通過(guò)多次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中）。 ?
2、向留有菌體沉淀的離心管中加入 200ul ?溶液Ⅰ(請(qǐng)先檢查是否已加入 RNaseA）, 使用移液器或旋渦振蕩器徹底懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀。再向其中加入 50ul ?溶菌酶，混勻。37℃水浴 30 min ?以上（根據(jù)菌液量可適當(dāng)加長(zhǎng)水浴時(shí)間）。注意：如果菌塊未徹底混勻，會(huì)影響裂解導(dǎo)致質(zhì)粒提取量和純度偏低。如不能確定為何種菌，請(qǐng)按陽(yáng)性菌處理。 ?
3、向離心管中加入 250ul ?溶液Ⅱ，溫和地上下翻轉(zhuǎn) 6-8 ?次使菌體充分裂解。注意：混勻一定要溫和，以免污染基因組 DNA，此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠，作用時(shí)間不要超過(guò) 5 min，以免質(zhì)粒受到破壞。 ?
4、向離心管中加入 350ul ?溶液Ⅲ，立即溫和地上下翻轉(zhuǎn) 6-8 次，充分混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。 11000rpm離心 10 min ?。注意：溶液Ⅲ加入后應(yīng)立即混勻，避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀，可再次離心后取上清。 ?
5、將上一步所得上清液加入吸附柱中（吸附柱加入收集管中），室溫放置 2min，12000rpm ?離心 1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中( ?如果一次加不完，可分兩次吸附) ?。 ?
6、向吸附柱中加入 700ul ?漂洗液( ?使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇) ?，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 ?
7、向吸附柱中加入 500ul ?漂洗液，12000rpm離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 ?
8、12000rpm 離心 2min，將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR ?等。 ?
9、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul ?經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置2min，12000rpm離心 1min，收集質(zhì)粒DNA溶液。 ?
10、（可選）為了增加質(zhì)粒的回收率，可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中，室溫放置2min， 12000rpm離心 1min。 ??
注意事項(xiàng)： ??
1、使用前請(qǐng)先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現(xiàn)混濁，如有混濁現(xiàn)象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復(fù)澄清后再使用。 ?
2、洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于 50ul，體積過(guò)小影響回收效率；洗脫液的 pH ?值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH值在 8.0 左右( ?可用 NaOH ?將水的 pH值調(diào)至此范圍) ?，pH值低于 7.0 會(huì)降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20 ℃，以防 DNA 降解。 ?
3、如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于 10kb 的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，使用 5-10ml 過(guò)夜培養(yǎng)物，同時(shí)按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)時(shí)間，以增加提取效率。 ?
4、 DNA濃度及純度檢測(cè)：得到的質(zhì)粒DNA純度與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)。得到的DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為 1 ?相當(dāng)于大約 50 μg/ml ?雙鏈DNA、40 μg/ml ?單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為 1.7-1.9 ?，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但并不表示純度低。
相關(guān)產(chǎn)品：
? E1020 EB 染色液?
? D1010 ?6×DNA Loading Buffer?
?T1060 50×TAE 緩沖液?
?T1050 5×TBE 緩沖液?
? M1060 ?D2000 DNA Ladder?
? M1400 ?1kb DNA Ladder?
?G8142 GoldView II型核酸染色劑(5000×)?
?L1015 LB 固體培養(yǎng)基(干粉)?
?L1020 SOC液體培養(yǎng)基(干粉)?
相關(guān)試劑盒：
| D1100 | 質(zhì)粒小量提取試劑盒 | 50T/100T | 120/160 |
| D1110 | 質(zhì)粒大量提取試劑盒 | 10T | 300 |
| D1120 | 革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒 | 50T/100T | 180/230 |
| D1130 | 革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒大量提取試劑盒 | 10T | 380 |
| D1140 | 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒 | 50T/100T | 280/380 |
| D1150 | 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒 | 10T | 420 |
| D1160 | 酵母質(zhì)粒提取試劑盒 | 50T/100T | 280/480 |
| D1200 | 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 | 50T/100T | 150/280 |
| D1250 | 聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 | ?20T/50T | ?240/520 |
| D1300 | DNA產(chǎn)物純化試劑盒 | 50T/100T | 150/280 |
| D1500 | 植物基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1600 | 細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1700 | 動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1800 | 全血基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D1850 | 全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng) | 50T/200T | 360/960 |
| D1900 | 酵母基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D2100 | 通用基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D2300 | 真菌基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 500/850 |
| D2400 | DNA病毒基因組提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| D2600 | 土壤基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 680/1200 |
| D2700 | 糞便基因組DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 400/700 |
| R2000 | RNA病毒基因組提取試劑盒 | 50T/100T | 700/1180 |
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? ? 北京索萊寶科技有限公司目前備有現(xiàn)貨1500種，當(dāng)天即可發(fā)貨，可以滿足大部分高等院校以及高級(jí)研究所的實(shí)驗(yàn)要求，同時(shí)省去您焦急等待的時(shí)間。歡迎前來(lái)咨詢。
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