鼠單抗Ig類(lèi)/亞類(lèi)鑒定用ELISA試劑盒（6種）
產(chǎn)品名稱(chēng)： 鼠單抗Ig類(lèi)/亞類(lèi)鑒定用ELISA試劑盒（6種）
英文名稱(chēng)： mAb Ig Elisa Kit
產(chǎn)品編號(hào)： FRD90100K6
產(chǎn)品價(jià)格： null
產(chǎn)品產(chǎn)地： 中國(guó)
品牌商標(biāo)： Frdbio
更新時(shí)間： 2023-08-15T17:03:56
使用范圍： 僅供科研使用
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
- 地址 : 光谷國(guó)際B座1513
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 湖北省
- 電話(huà) : 158****4543 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : 2633787800@qq.com
- 二維碼 : 點(diǎn)擊查看
試劑原理：
本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類(lèi)和亞類(lèi)（可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA）。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包被微孔板，與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合，再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類(lèi)、亞類(lèi)的抗體來(lái)分別反應(yīng)，最后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止，再通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度來(lái)判斷被測(cè)單克隆抗體的類(lèi)或亞類(lèi)。亦可通過(guò)肉眼觀察顏色深淺直接判斷結(jié)果。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
高靈敏度、高特異性、無(wú)交叉反應(yīng)，檢測(cè)樣品范圍廣泛結(jié)果容易判定。
保存條件：
不開(kāi)啟2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過(guò)于頻繁開(kāi)啟使用有可能因此使效期縮短。組成成分：
組分名稱(chēng) | 組分規(guī)格 | ?組分?jǐn)?shù)量 |
包被抗小鼠抗體共位點(diǎn)酶標(biāo)板??? | 96孔 | 2 |
自封袋??????? | 個(gè) | 2 |
亞型抗體酶標(biāo)二抗（即用型）??????? | 4ml/種 | 6種 |
陽(yáng)性對(duì)照(+) | 1.5ml | 1 |
陰性對(duì)照(-) | 1.5ml | 1 |
樣本稀釋液 | 30ml | 2 |
單組份TMB底物液 | 25ml | 1 |
TMB底物終止液 | 15ml | 1 |
加樣圖 | 2份 | |
20×洗滌液 | 30mL | 2 |
封板膜 | 5張 | |
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) | 1份 |
使用范圍：
用于鑒定細(xì)胞上清及腹水中小鼠單克隆抗體Ig類(lèi)、亞類(lèi)\亞型的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。
使用方法：
使用方法：
1、將ELISA試劑盒各組分恢復(fù)室溫（大約30分），同時(shí)用純水將20×洗滌液配成工作液（每份濃縮洗滌液加19份純水）。
2、取出酶標(biāo)板；扣取適量酶標(biāo)板條，每個(gè)標(biāo)本需要6孔，陽(yáng)性對(duì)照6孔，陰性對(duì)照6孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。
3、將標(biāo)本檢測(cè)孔每孔先加入標(biāo)本稀釋液各50μl。然后將50μl細(xì)胞培養(yǎng)上清（或特異親和純化的抗體）再加入酶標(biāo)微孔板，每個(gè)標(biāo)本加6孔；陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照孔不加標(biāo)本稀釋液，各加6孔每孔100μl。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4、反應(yīng)完畢后棄去板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。再在每個(gè)標(biāo)本的6孔中分別加入6種酶標(biāo)二抗各100μl，通用陽(yáng)性、陰性對(duì)照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5、吸棄板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。每孔分別加入單組份TMB底物液100μl，封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。
6、本試劑盒特異性好，可肉眼觀察顯色結(jié)果，確定顯色孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗判斷此標(biāo)本的Ig類(lèi)或亞類(lèi)。也可將反應(yīng)終止液（每孔50μl）終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測(cè)定波長(zhǎng)，630nm參考波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果，參看高值孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗判定此標(biāo)本的Ig類(lèi)或亞類(lèi)(陽(yáng)性對(duì)照OD一般不小于0.8，陰性對(duì)照一般不高于0.15，陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：樣品OD大于陰性O(shè)D+0.15，陰性O(shè)D低于0.05按0.05算)。
?
注：單抗屬于雜交瘤融合得來(lái)，存在一定比例的變異，另外，如果待檢樣品濃度太高也容易造成背景偏高，原則上以高值孔對(duì)應(yīng)的亞類(lèi)為準(zhǔn)！
?
注意事項(xiàng)：
1.???本試劑盒實(shí)際壽命遠(yuǎn)比標(biāo)示的有效期更長(zhǎng)，超過(guò)有效期后可能仍可使用，但是不建議您使用，請(qǐng)您在有效期內(nèi)使用；超過(guò)有效期使用產(chǎn)品產(chǎn)生的問(wèn)題不在售后范疇。
2.???由于腹水成分十分復(fù)雜，本試劑盒不建議用于腹水檢測(cè)，如果需要檢測(cè)腹水，請(qǐng)購(gòu)買(mǎi)本公司其他試劑盒；如果確實(shí)需要用本試劑盒檢測(cè)腹水亞型，建議將腹水稀釋1-5萬(wàn)倍，同時(shí)使用自包被的抗原板子替代本試劑盒中的酶標(biāo)板，此種情況下本試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照可能不能正常工作。
3.???手工洗板時(shí)，洗液要加滿(mǎn)板孔，浸泡10秒然后棄盡，最后要拍干凈。加入的酶標(biāo)二抗溫育后，要把酶標(biāo)液吸凈，不要直接甩出，這個(gè)在手工洗板時(shí)對(duì)結(jié)果很重要。
4.???一次沒(méi)用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好，隨盒存放。
5.???拿放加樣后的板子不要?jiǎng)×叶秳?dòng)，以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。
6.???本試劑一般不會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)陽(yáng)性，但出現(xiàn)兩個(gè)陽(yáng)性的現(xiàn)象現(xiàn)實(shí)中是真實(shí)存在的，一般會(huì)取高OD值判為陽(yáng)性，出現(xiàn)這種情況有多重原因：1）培養(yǎng)的細(xì)胞中有“飼養(yǎng)細(xì)胞”殘留；2）由于單抗研制存在人工干預(yù)步驟因此抗體本身有可能會(huì)存在亞類(lèi)結(jié)構(gòu)上的輕微變異； 3）樣品為非特異親和純化的抗體或樣品是腹水，4）上清出現(xiàn)少量污染；5）實(shí)驗(yàn)操作粗放；6）加錯(cuò)試劑；7）樣品中抗體濃度太高。
?
特別提示：
不具備ELISA基礎(chǔ)知識(shí)和操作的人員不要完成此實(shí)驗(yàn)或類(lèi)似實(shí)驗(yàn)，因?yàn)檫@可能會(huì)給您帶來(lái)錯(cuò)誤的結(jié)果和不必要的損失。