rTEV蛋白酶使用說明書
貨號：P2060
規格：1000U（200uL）

產品簡介：
rTEV蛋白酶(重組型)是經過基因工程改造后的重組蛋白酶，該酶特異性識Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。
rTEV蛋白酶與腸激酶U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO等蛋白酶相比，具有高活性、高特異性的雙重特點，rTEV蛋白酶因具高剪切活性和特異性，已成為融合蛋白表達后去除融合tag的首選蛋白酶。
該酶經6×His標簽純化而得(含組胺酸標簽)，純度達99％，剪切反應完畢后可通過His標簽純化樹脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除。
產品內容：
試劑名稱	rTEV蛋白酶規格	?rTEV蛋白酶保存溫度 rTEV蛋白酶（5U/uL）	200uL	 -80℃
250×rTEV Protease Buffer	1mL	 -20℃
說明書	1份
保存rTEV蛋白酶條件：rTEV蛋白酶-80℃長期保存，可存儲2年；首次使用后可置于-20℃保存，可儲存6個月，避免反復凍融。250×rTEV Protease Buffer可置于-20℃保存。
酶活定義：
在1×rTEV Protease Buffer中，30℃反應1h，剪切>85%的3ug底物所需要的酶量定義為一個活性單位。
使用方法說明：
1.推薦使用溶液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油，pH 8.0 buffer中進行剪切。
2.250×rTEV Protease Buffer：250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0
3.rTEV蛋白酶與需要酶切的目的蛋白比例：1：100
4.酶切體系：
	融合蛋白1000 ug
	250×rTEV Protease Buffer 4uL						
	rTEV蛋白酶2uL
	定容至1000uL
	定容緩沖液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl
5.酶切條件：在16℃酶切6hr。用戶可以根據自己研究的目的蛋白進行摸索酶切條件，可適當加大酶量或延長酶切時間。
6.可取少量樣本進行SDS-PAGE分析，若要去除酶切后體系中的rTEV蛋白酶，可用His標簽純化樹脂親和層析。