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單克隆抗體技術

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產品名稱: 單克隆抗體技術

英文名稱: monoclonal antibody technique

產品編號:

產品價格: 歡迎來電詳詢023-65316016,023—65316556

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更新時間: 2023-07-31T09:56:51

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單克隆抗體制備技術服務
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單克隆抗體(單抗)應用淋巴細胞雜交瘤技術將免疫動物的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞,通過HAT篩選,ELISA抗體檢測,有限稀釋克隆化,選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細胞的雜交瘤細胞,并產生抗體,就是單克隆抗體。單抗的最大優勢是它的特異性、均一性、高效性和無限供應性。在免疫學、醫學、生物學等領域的基礎研究和臨床醫學上,包括對疾病(包括癌癥)的診斷、預防和治療等方面,均顯示出巨大的生命力。

實驗步驟:

1. 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 選取ELISA效價較高的小鼠,取脾細胞與SP2/0細胞融合
3. 進行2~4次克隆化及ELISA篩選,確保雜交瘤細胞分泌抗體的穩定性
4. 抗體亞類鑒定
5. 至少選擇2株雜交瘤細胞的凍存,并免費提供一年的保種服務

單抗制備標準流程:
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時間(天)制備步驟說明
1初次免疫每種抗原免疫5只Balb/c小鼠,抗原與弗氏完全佐劑
22第二次免疫抗原與弗氏不完全佐劑
43第三次免疫抗原與弗氏不完全佐劑
免疫一周后取血+ELISA檢測效價
57加強免疫單獨抗原
三天后采血(血清做陽性對照),取脾
60細胞融合SP2/0骨髓瘤細胞與一只小鼠(ELISA效價較高)的脾細胞融合
70-100HAT選擇雜交瘤細胞ELISA效價檢測篩選陽性細胞克隆
??至少進行2~4次雜交瘤細胞的亞克隆,直至細胞上清的ELISA結果陽性
率達到100%,將完成細胞建株
115-120亞類鑒定對雜交瘤細胞株所分泌的抗體進行亞類測定
120凍存細胞株每種抗原提供2株雜交瘤細胞
121-140制備腹水并純化接種細胞制備腹水、Protein A/G 純化
150最終提供2株雜交瘤細胞和相應Protein A/G 純化的單抗IgG,2~5mg/株
完整的技術服務報告
完整實驗記錄
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抗體的應用:制備的抗體可能用于ELISA、WB、IHC、IP等實驗。
客戶需提供的材料及信息:
  • 客戶需要提供2mg以上的純化蛋白質,純度≥90%(SDS-PAGE檢測),若帶融合標簽需說明并提供篩選蛋白
  • 如為多肽,客戶要提供兩種偶聯不同蛋白質的多肽各4mg,未偶聯多肽1mg,偶聯多肽純度≥85%
結果提供:實驗報告?????????????????? 免疫前血清(20μl)????? ???免疫后血清(20μl)
抗體上清(至少3株,1ml/株)?? 雜交瘤細胞(3株)?????????? 抗體亞型
如需要純化的客戶增加如下結果:
純化抗體(3株)(純度≥90%,濃度≥1mg/ml,每株5mg)?? 免疫效價?? 抗體親和力常數
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相關說明:
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A、免疫原可以為重組蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶聯小分子等。
B、客戶需要承諾外的細胞株,每株價格為500元。
C、客戶需要對承諾外的細胞株抗體進行純化,價格為1500元/5mg(單獨報價為1800元)。
D、如客戶需要非IgG類的其他細胞株,每株價格500元,純化費用500元/5mg(CAAS法純化)

威斯騰實驗服務流程



威斯騰生物服務項目

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分子生物學檢測蛋白質與免疫學動物實驗
實時熒光定量PCR單克隆抗體制備帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP多克隆抗體制備抑郁癥動物模型
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術Western-blot?實驗服務脊髓損傷模型
生化指標檢測蛋白雙向電泳實驗服務腦外損傷模型
雙熒光素酶報告基因檢測原核蛋白表達純化骨神經損傷模型
染色質免疫共沉淀(ChIP真核蛋白表達純化心肌缺血模型
GST?pull?DownITRAQ定量蛋白質組學心力衰竭模型
SLAC蛋白組學肺動脈高血壓動物模型
高血壓模型
病毒包裝實驗課題整體外包粥樣動脈硬化模型
過表達/干擾慢病毒包裝純化整體課題外包大腦中動脈阻塞模型
過表達/干擾腺病毒包裝純化細胞整體實驗外包慢性之氣管炎模型
逆轉錄病毒包裝純化動物整體實驗外包過敏性哮喘模型
腺相關病毒包裝純化肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片原代細胞培養肝纖維化模型
細胞因子芯片骨髓間充質干細胞培養膽結石模型
BioPlex懸浮芯片脂肪干細胞培養急性胰腺炎模型
生長因子芯片心肌成纖維細胞培養急性腎衰竭模型
炎癥因子芯片軟骨細胞培養體內血栓模型
血管生成因子芯片血管內皮細胞培養關節炎模型
凋亡因子芯片神經元細胞培養I型和II型糖尿病模型
趨化因子芯片內皮組細胞原代培養裸鼠成瘤
HuProt?TM?20K人類蛋白組芯片基因編輯動物
電生理相關服務動物整體實驗服務
膜片鉗實驗
細胞生物學檢測高通量測序代謝組學
細胞原代培養mRNA測序氣相色譜GC/MS
MTT檢測LncRNA測序液相色譜LC/MS
細胞凋亡檢測全基因組測序核磁共震NMR
細胞周期檢測RNA-Seq測序
細胞克隆形成實驗外顯子測序影像學相關實驗
Transwell細胞遷移/侵襲16s擴增子測序Micro-CT
流式分選Small?RNA測序小動物活體成像
CCK8/XTT檢測宏基因組測序核磁共振
臺盼藍檢測細胞活性單細胞測序PET-CT
藥物篩選細胞學實驗circleRNA測序
細胞粘附性檢測甲基化測序基因編輯動物
細胞劃痕實驗條件性敲除小鼠/大鼠
細胞生物學整體實驗全基因敲除小鼠/大鼠
細胞成管實驗
病理檢測CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入基因芯片
掃描電鏡基因定點突變細胞系LncRNA芯片
透射電鏡單基因敲除細胞系miRNA芯片
HE染色多基因敲除細胞系mRNA芯片
免疫組化目的基因敲入細胞系甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
Tunel(原位末端凋亡法)檢測報告基因敲入細胞系SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除細胞系
免疫熒光
Masson染色CRISPR/Cas9動物敲除/敲入科研設計指導&文章評估/潤色
原位雜交基因敲除大鼠/小鼠科研文獻論著翻譯
熒光原位雜交基因敲入大鼠/小鼠論文翻譯潤色服務
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