人維生素C(VC)ELISA kit
產(chǎn)品名稱： 人維生素C(VC)ELISA kit
英文名稱： Human Vitamin C,VC ELISA Kit
產(chǎn)品編號(hào)：
產(chǎn)品價(jià)格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國
品牌商標(biāo)： 進(jìn)口
更新時(shí)間： null
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 :
- 地址 : 上海市楊浦區(qū)民京路658弄21號(hào)1701
- 郵編 : 200438
- 所在區(qū)域 : 上海
- 電話 : 187****6660：187****5559 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : yupingbio@126.com
人維生素C(VC)ELISA kit
人維生素C（VC）定量檢測試劑盒（ELISA）
使用說明書
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【試劑盒名稱】
人維生素C（VC）定量檢測試劑盒（ELISA）
【試劑盒用途】
定量檢測人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中維生素C（VC）的含量。
【檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被人維生素C（VC）抗體透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中人維生素C（VC）濃度呈正相關(guān)，450nm波長下測定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中人維生素C（VC）含量。
【試劑盒組成】
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1 |
酶標(biāo)包被板 |
12孔×8條 |
7 |
顯色劑A液 |
6mL |
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2 |
標(biāo)準(zhǔn)品：800umol/L |
0.6mL |
8 |
顯色劑B液 |
6mL |
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3 |
20倍濃縮洗滌液 |
25mL |
9 |
終止液 |
6mL |
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4 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
6mL |
10 |
說明書 |
1份 |
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5 |
樣本稀釋液 |
6mL |
11 |
封板膜 |
2張 |
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6 |
酶標(biāo)試劑 |
6mL |
12 |
密封袋 |
1個(gè) |
備注：標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為：800、400、200、100、50、25umol/L
【需要而未提供的試劑和器材】
1、37℃恒溫箱
2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
3、精密移液器及一次性吸頭
4、蒸餾水
5、一次性試管
6、吸水紙
【操作步驟】
1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對(duì)照孔不加。
4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板）。
6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加。
7、溫育：重復(fù)4的操作。
8、洗板：重復(fù)5的操作。
9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。
10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。
12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。最終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
【樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)?/SPAN>疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。
2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。
【注意事項(xiàng)】
1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
TUNEology 波長可調(diào)檢測卡盒-->