人神經(jīng)特異性烯醇化酶ELISA北京檢測/人NSE ELISA血清代測
產(chǎn)品名稱: 人神經(jīng)特異性烯醇化酶ELISA北京檢測/人NSE ELISA血清代測
英文名稱:
產(chǎn)品編號: ELISA實驗代測
產(chǎn)品價格: null
產(chǎn)品產(chǎn)地: 加拿大/中國
品牌商標(biāo): 北京方程生物
更新時間: null
使用范圍: 說明書
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人神經(jīng)特異性烯醇化酶ELISA北京檢測/人NSE ELISA血清代測
Elisa實驗常用方法:?
雙抗體夾心法測定抗原?
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將抗原免疫第一種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
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加抗原,形成抗原-抗體復(fù)合物;?
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加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復(fù)合物;
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加酶標(biāo)抗抗體(第二種動物抗體的抗體);?
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加底物。底物的降解量=抗原量。
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人神經(jīng)特異性烯醇化酶ELISA北京檢測/人NSE ELISA血清代測
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:?
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。?
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。?
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。?
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。?
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。?
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
人神經(jīng)特異性烯醇化酶ELISA北京檢測/人NSE ELISA血清代測
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