?T4 RNA連接酶1
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| T4 RNA 連接酶1催化3’→5’磷酸二酯鍵的形成，使核苷酸的5’-磷酸末端和3’-羥基末端連接，伴隨著ATP水解為AMP和PPi。T4 RNA 連接酶1的作用底物包括單鏈RNA、DNA及二核苷焦磷酸，它可催化ssDNA和RNA的連接，相對于ssDNA，該酶對RNA分子的連接和環化效率更高。 |  |
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組分 |
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應用 |
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活性定義 |
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| 1單位指在1×T4 RNA Ligase Buffer 中，37℃條件下，30分鐘內將1nmol的5’-[32P]rA16轉化為磷酸鹽不溶物質所需要的酶量。 | ||||||||||||||
儲存 |
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| -20℃可保存3年。 | ||||||||||||||
使用注意事項 |
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| 1.1× T4 RNA Ligase Buffer：50mM Tris-HCl pH 7.5，10mM MgCl2，1mM DTT。該酶反應時需要加入終濃度1mM ATP。 2. 最佳反應溫度37℃，65℃ 10min可使該酶失活。 3. 該酶的連接底物無論是ssDNA還是ssRNA均需要5’-磷酸化或預腺苷化。 4. 該酶不能連接雙鏈DNA或RNA。 5. 加入終濃度5~10% PEG 8000或增加孵育時間可提高連接效率。 |
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