大腸桿菌0157測試片原理及適用范圍-技術前沿-資訊-生物在線

大腸桿菌0157測試片原理及適用范圍

作者:上海廣銳生物科技有限公司 2016-11-22T19:59 (訪問量:7190)

大腸桿菌0157測試片原理及適用范圍

1、原理及適用范圍

大腸桿菌0157測試片是一種預先制備好的一次性培養基產品,含有選擇性培養基和專一性的酶顯色劑,菌落在測試片上呈藍色,這樣可縮短計數時間和增強計數效果。本產品適合于各類食品及飲用水中大腸桿菌0157:H7的測定,

2、使用方法

2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成 1:10的樣品勻液,必要時用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調節樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品 勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。

2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直 接吸取原液進行檢測。將測試片置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層 膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。

2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。一般食品培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h;水產品培養溫度為30℃±1℃,培養48h。

3、結果判讀

培養后,測試片上紫紅色菌落為大腸桿菌0157:H7,藍色菌落為其他大腸菌群菌落。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。

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