??? elisa試劑盒實驗準備分析保溫常識！
??? 在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。elisa試劑盒以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。
??? elisa試劑盒溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時，產(chǎn)物的生成可達頂峰。為加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為徹底，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中，以形成最多的沉淀。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予采用。
??? elisa試劑盒保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，最后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標準室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA板只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規(guī)定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。
??? 一個良好的實驗操作環(huán)境可以保證ELISA試劑盒測定結(jié)果更準確。實驗操作的嚴謹性與實驗操作規(guī)范密不可分，未使用的試劑應儲存于2-8℃，使用時應回溫到室溫（20-25℃）。切忌不同批次的試劑混合使用，要經(jīng)常檢查酶標儀和微量移液器的精度盒準備度，這樣才能保證實驗的可操作性。
elisa試劑盒實驗準備分析保溫常識！
作者：上海遠慕生物科技有限公司 2016-01-04T00:00 (訪問量:8843)
上海遠慕生物科技有限公司 商家主頁
地 址： 上海浦東新區(qū)川沙經(jīng)濟園區(qū)
聯(lián)系人： 俞燕熙
電 話： 021-58999639
傳 真： 021-50760790
Email：m13310162040@163.com
相關(guān)咨詢
各種生化分析檢驗系統(tǒng)介紹 (2017-05-08T11:28 瀏覽數(shù):25461)
支原體染色檢測試劑盒 (2017-01-06T16:26 瀏覽數(shù):24463)
ELISA產(chǎn)品會出現(xiàn)的問題及解決辦法 (2016-12-21T16:14 瀏覽數(shù):23780)
遠慕告知您ELISA最基本的操作原理! (2016-12-07T15:10 瀏覽數(shù):38322)
遠慕ELISA試劑盒實驗原理和操作注意事項 (2016-10-26T16:22 瀏覽數(shù):38852)
遠慕生物介紹：常用電泳試劑 (2016-10-11T11:06 瀏覽數(shù):22040)
遠慕生物-雞免疫球蛋白G試劑盒 (2016-09-23T09:39 瀏覽數(shù):21903)
上海遠慕：印度墨汁 (2016-09-07T10:20 瀏覽數(shù):22030)
單細胞凝膠電泳標準操作 (2016-08-22T16:02 瀏覽數(shù):37403)
胎牛血清質(zhì)量該怎樣辨別?看顏色就知道嘛？ (2016-09-09T10:19 瀏覽數(shù):24334)