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??? ELISA最基本的操作原理：
??? 本試驗同時設標準陰、陽性血清對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。
??? 常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。酶聯免疫吸附試驗：是酶免疫測定技術中應用最廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體（聚苯乙烯微量反應板）表面，使酶標記的抗原-抗體反應在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。
??? 1、阻斷ELISA：
??? 本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現已成為豬傳染性胃腸炎（TGE）、豬偽狂犬?。≒R）及豬胸膜肺炎（AP）的主要檢測方法。
??? 下面以AP2型抗體的阻斷ELISA檢測法為例介紹其操作程序：
??? 首先將100μlAP2型工作量抗原包被→4℃過夜，洗滌三次、拋干；然后加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl→37℃60分鐘，洗滌三次、拋干；接著加100μl工作量兔抗AP2型血清→37℃30分鐘，洗滌三次、拋干；最后加100μlOPD底物液→37℃20分鐘，加終止液用ELISA檢測儀測定OD值。
??? 2、競爭ELISA：此法主要用于測定小分子抗原及半抗原，其原理類似于放射免疫測定。
??? 其基本程序為：抗體包被→4℃過夜，洗滌三次、拋干。加入待檢抗原及一定量的酶標抗原（對照孔僅加酶標抗原）→37℃60分鐘，洗滌三次、拋干加底物液→37℃20分鐘，加終止液用ELISA檢測儀測定OD值。
??? 被結合的酶標抗原的量由酶催化底物反應產生有色產物的量來確定，如果待檢溶液中抗原越多，被結合的標記抗原的量就越少，有色產物就減少，這樣根據有色產物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優點在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測；其主要不足在于每種抗原都要進行酶標記，而且因為抗原的結構不同，還需應用不同的結合方法。此外試驗中應用酶標抗原的量較多。