大鼠胱天蛋白酶-3（caspase-3）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中胱天蛋白酶-3（caspase-3）含量。
?上海裕平生物科技公司高品質(zhì)ELISA試劑盒供應(yīng)商，品質(zhì)卓越，價(jià)格實(shí)惠，售后完善，并提供免費(fèi)代檢測(cè)服務(wù)。
咨詢熱線：021-60545848-55123867? 手機(jī):18721526660-18721505559???? 傳真：021-55123867
實(shí)驗(yàn)原理：
??? 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠胱天蛋白酶-3（caspase-3）水平。用純化的大鼠胱天蛋白酶-3（caspase-3）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胱天蛋白酶-3（caspase-3），再與HRP標(biāo)記的胱天蛋白酶-3（caspase-3）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胱天蛋白酶-3（caspase-3）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠胱天蛋白酶-3（caspase-3）濃度。
試劑盒組成：
|
試劑盒組成 |
????? 48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
|
說明書 |
1份 |
1份 |
|
|
封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
|
|
密封袋 |
1個(gè) |
1個(gè) |
|
|
酶標(biāo)包被板 |
1×48 |
1×96 |
2 |
|
標(biāo)準(zhǔn)品：18U/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2 |
|
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2 |
|
酶標(biāo)試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
|
終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2 |
|
濃縮洗滌液 |
（20ml×20倍）×1瓶 |
（20ml×30倍）×1瓶 |
2 |
樣本處理及要求：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2
操作步驟
1.???????? 標(biāo)