為滿足客戶對(duì)抗目標(biāo)靶標(biāo)物單克隆抗體的迫切需求,博奧森單抗制備團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)多年的系統(tǒng)深入研究，發(fā)現(xiàn)了外源細(xì)胞因子對(duì)雜交瘤形成與生長(zhǎng)調(diào)節(jié)規(guī)律，提出 了一種全新技術(shù)方案，通過(guò)探明人類干細(xì)胞因子bFGF、HFCS對(duì)目標(biāo)多肽以及靶標(biāo)蛋白陽(yáng)性雜交瘤形成與生長(zhǎng)調(diào)節(jié)規(guī)律，創(chuàng)建了雜交瘤細(xì)胞株半固體干細(xì)胞培 養(yǎng)基-梯度篩選法（簡(jiǎn)稱"兩步篩選法"），突破了常規(guī)HAT、HT培養(yǎng)篩選法陽(yáng)性率低、隨機(jī)性大的局限。單克隆抗體制備服務(wù)最快可在100天內(nèi)完成單抗制 備過(guò)程，并且保證為客戶提供2個(gè)陽(yáng)性克隆以及高親和力的抗體產(chǎn)品。
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上海遠(yuǎn)慕生物公司可根據(jù)客戶的不同需要提供經(jīng)濟(jì)、快速而可靠的單克隆抗體制備的完整解決方案，本項(xiàng)技術(shù)服務(wù)包括：
??- Balb/c純系小鼠免疫；
??- 脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞的融合；
??- 抗體產(chǎn)生細(xì)胞的ELISA篩選；
??- 抗體產(chǎn)生細(xì)胞的亞克隆與擴(kuò)增；
??- 指定細(xì)胞克隆的體外培養(yǎng)或腹水瘤接種法生產(chǎn)單克隆抗體。
一、單抗制備服務(wù)周期、制備步驟、制備說(shuō)明： ?? ????
服務(wù)周期（天）?? ?制備步驟?? ?制備說(shuō)明?? ??? ??? ??? ??? ??? ??? ?
1?? ?一次免疫?? ?每種抗原免疫5只Balb/c小鼠，抗原與弗氏完全佐劑乳化?? ??? ?
服務(wù)周期（天）?? ?制備步驟?? ?制備說(shuō)明?? ??? ??? ??? ??? ??? ??? ?
1?? ?一次免疫?? ?每種抗原免疫5只Balb/c小鼠，抗原與弗氏完全佐劑乳化?? ??? ?
22?? ? ? ????? 二次免疫?? ?抗原與弗氏不完全佐劑乳化?? ???
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43?? ? ? ? ??? 三次免疫?? ?抗原與弗氏不完全佐劑乳化；
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???????????????????? ? ? ?????????? 免疫一周后取血+ELISA檢測(cè)效價(jià)。??
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57?? ? ? ? ?? 加強(qiáng)免疫?? ?單獨(dú)抗原直接免疫；
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????????????????????? ? ?????????? 三天后采血（血清做陽(yáng)性對(duì)照），取脾。??
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60?? ? ? ? ?? 細(xì)胞融合?? ?SP2/0骨髓瘤細(xì)胞與小鼠（ELISA效價(jià)較高）的脾細(xì)胞融合?? ???
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70-100?? ?HAT選擇雜交瘤細(xì)胞?? ?ELISA效價(jià)檢測(cè)篩選陽(yáng)性細(xì)胞克隆
??????????????????????????????? 雜交瘤細(xì)胞的亞克隆
??????????????????????????????? 至少進(jìn)行2~4次雜交瘤細(xì)胞的亞克隆，直至細(xì)胞上清的ELISA結(jié)果陽(yáng)性率達(dá)到100%，將完成細(xì)胞建株?? ?。?? ?
70-100?? ?HAT選擇雜交瘤細(xì)胞?? ?ELISA效價(jià)檢測(cè)篩選陽(yáng)性細(xì)胞克隆
??????????????????????????????? 雜交瘤細(xì)胞的亞克隆
??????????????????????????????? 至少進(jìn)行2~4次雜交瘤細(xì)胞的亞克隆，直至細(xì)胞上清的ELISA結(jié)果陽(yáng)性率達(dá)到100%，將完成細(xì)胞建株?? ?。?? ?
115-120?? ?亞類鑒定?? ?對(duì)雜交瘤細(xì)胞株所分泌的抗體進(jìn)行亞類測(cè)定?? ???
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120? ? ? ? ?? 凍存細(xì)胞株?? ?每種抗原提供2株雜交瘤細(xì)胞?? ??? ??? ?
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121-140?? ?制備腹水并純化?? ?接種細(xì)胞制備腹水、Protein A/G純化???
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