環氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數—操作方法
取芽孢數在30cfu/mL-300cfu/mL的稀釋級別的試管(10-4)震蕩30s,每支稀釋管平行制備2個平皿,每皿加1mL菌懸液,注入15mL-20mL溫度不超過45℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養基(TSA)。等待瓊脂凝固后,倒置于30℃-35℃培養箱中培養48h-72h后計數。
總芽孢數cfu/片(支)=平均菌落數×稀釋倍數。
注意事項
1、切勿將生物指示劑進行紫外照射消毒,建議對初級包裝進行擦拭。
2、環氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數,建議使用含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水進行稀釋。
3、吸取含紙質載體的菌液時,避免纖維堵槍頭,導致移液不準確。
4、建議以單片(支)生物指示劑的形式進行計數,確保每片(支)生物指示劑計數結果均符合要求。
5、建議使用玻璃珠(4mm-6mm)對紙質載體進行打散處理。
6、芽孢計數過程中必須進行熱激活處理:溫度80℃-85℃,時間10min。
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