腺病毒上清感染使用說明書-其它資料-資訊-生物在線

腺病毒上清感染使用說明書

作者:和元生物技術(上海)股份有限公司 2014-03-12T00:00 (訪問量:18725)

?腺病毒病毒上清感染細胞的方案

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第一天? 目的細胞鋪板(24孔板為例)

將細胞狀態良好的目的細胞(293T細胞為例),用0.25%胰酶消化下來,把細胞濃度調整為3.0*105cells/孔接種于24孔板,按500ul/孔培養基加入。

接種目的細胞的數量因細胞生長速度而有所不同,一般保證在第二天進行病毒感染時細胞匯合度達到90%95%之間為宜。

第二天? 病毒感染

1 計算所要添加的病毒量

Vml=MOI*細胞數量/病毒滴度

MOI=5,細胞數為3.0*105cells,病毒的滴度1.5*108ifu/ml為例

所需要加的病毒的體積為:

V=5*3.0*105cells/1.5*108

??= 1*10-2ml

備注:如果所加的病毒量低于2.0ul時,則需要稀釋病毒原液后,再加病毒液體。

2 病毒感染

取出24孔板中舊培養基,加入無血清的含有所需要病毒量的培養基500ul400ul+100ul稀釋的病毒液體)。

3 換液

感染實驗同一天,2h后,棄去上清,換成10%血清的培養基,500ul/孔。

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