【小福支招】單抗融合不成功,融合效率低,融合后半死不活,八成是支原體污染!
支原體污染是細胞培養的一大殺手,做單抗每天都要與細胞打交道,難免不收支原體的*擾,有時候即使是老司機也不一定容易被發現。支原體污染潛在來源:一是血清;二是細胞;三是環境;四是操作。如果不是環境(包括培養箱)中有大量支原體的話,都是比較好處理。我們再培養SP2/0的時候,由于其長勢較快,輕微的污染不容易被看到,但是融合的細胞比較嬌嫩,往往會阻遏融合細胞生長,細胞融合yiciliangci 不成功效率低,我們往往最容易想到的是試劑和操作的污染,我們把所有的東西都換了一遍,融合仍然沒有改善;怎么辦?
細胞支原體污染的判別方法,一般用支原體PCR擴增檢測方法,當然也可以用環等溫快速檢測試劑盒,但是由于支原體分型較多,市面上的試劑盒質量參差不齊,有時候對于輕度污染并不一定能很好的檢出。因此,在發現細胞碎片增多,長勢不好,細胞周末有鐵壁的類似煎雞蛋樣附著物在細胞貼壁附近的時候,可以懷疑支原體污染,建議買一支雜交細胞支原體清除試劑(貨號:MAC0020)按照說明書方法,使用支原體試劑處理細胞,如果處理后細胞狀態有明顯改善的話,再連續培養一段時間,支原體基本可以被完全清除掉。
