?Taq DNA連接酶
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| Taq DNA 連接酶是一種熱穩定性連接酶，能夠催化磷酸二酯鍵的形成，使與同一互補靶 DNA 鏈雜交的兩條相鄰寡核苷酸鏈的 5′-磷酸末端和 3′-羥基末端通過磷酸二酯鍵相連。Taq DNA 連接酶催化的連接反應只有當兩條寡核苷酸鏈與互補靶 DNA 完全配對，并且兩條寡核苷酸鏈之間沒有空隙的條件下才可發生。因此，可以用它來檢測單堿基替換。在 45℃-65℃ 范圍內，Taq DNA 連接酶均有活性。 | |||||||||||||
組分 |
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應用 |
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活性定義 |
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| 1 單位指 50μl 反應體系中，45℃ 條件下，15 分鐘內能使 50% 的1μg 經 BstEII 消化的 λDNA 片段（12 bp 粘性末端）發生連接所需要的酶量。 | |||||||||||||
儲存 |
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| -20℃可保存半年，長期儲存請置于 -70℃。 | |||||||||||||
1× Taq DNA 連接酶反應緩沖液 |
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| 20 mM Tris-HCl（pH 7.6），25 mM KAc，10 mM Mg(Ac)2，10 mM DTT，1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100，45℃ 溫育。 該酶需 NAD+ 作輔因子，在 10× Taq DNA 連接酶緩沖液中已添加 NAD+；為了延長 NAD+ 的半衰期，緩沖液應于 -70℃ 貯存。 ? |